13C标记法测定猪血液、大肠组织和大肠内容物中挥发性脂肪酸含量
2021-10-21吕良康赵胜军
张 博,杨 俊,冯 志,李 强,吕良康,任 莹,2,赵胜军,2*
(1.武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点实验室,湖北武汉 430023;2.动物营养与饲料安全湖北省协同创新中心,湖北武汉 430023)
适宜含量和比例的挥发性脂肪酸(VFA)构成是保证肠道正常和稳定的前提之一[1]。有研究表明,大肠微生物发酵产生的VFA 可维持体液和电解质平衡,为宿主提供能量[2]。其中,乙酸可穿过血脑屏障,通过其稳态调节食欲[3-4];乙酸和丙酸可以直接激活G 蛋白偶联受体[5];丁酸是肠道细胞的关键能量来源,还能促进胃排空以及维持肠道黏膜的屏障作用,也可以抑制组蛋白去乙酰化酶的活性,降低结肠癌和结肠炎的风险[6-8]。
猪大肠发酵产生的一部分VFA 在肠道被吸收,供机体利用,未被吸收利用的则随着大肠内容物以粪便形式排出体外。因此,测定猪大肠VFA 的产生量首先要了解VFA 在体内的去向。Douglas 等[9]利用同位素示踪技术研究结肠微生物发酵产生的VFA 产量与全身VFA 通量的关系,结果表明[2H]-VFA 和[13C]-VFA 可用于测量机体VFA 通量,且方法简单精准。Markantonatos 等[10]研究发现,使用[13C]-VFA 作为示踪剂可准确获得稳态条件下荷斯坦母牛瘤胃的VFA 代谢信息。故基于VFA 在猪大肠吸收和利用的重要性,本试验推测可利用 [13C]-VFA 稳定性同位素灌注法,跟踪猪大肠内产生的VFA 的去向,获得猪体内的VFA 代谢信息。目前有关猪血液、大肠组织和大肠内容物中[13C]-VFA 的测定方法未见报道。因此,本试验旨在采用气相色谱-质谱联用法对猪血液、大肠组织和大肠内容物中[13C]-VFA 含量进行分析研究,并对该方法进行精准性验证,为该方法广泛应用于研究大肠VFA 利用提供理论依据。……
