李 飒，房晓欢，齐雅天，王志刚,2，陶晨雨,2，孙树春,2*，李俊杰,2*

（1.河北农业大学动物科技学院，河北保定 071000；2.河北省牛羊胚胎技术创新中心，河北保定 071000）

颗粒细胞作为卵泡的重要组成部分，在维持雌性动物生殖功能中起着重要作用[1]。颗粒细胞的增殖分化可促进卵泡发育、卵母细胞成熟等，其凋亡是卵泡闭锁的主要原因，而其抗氧化能力也有利于保护卵母细胞免受氧化损伤[2-4]。Sirt2 是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）活性的组蛋白去乙酰化酶，广泛表达于哺乳动物的多种组织和器官，主要位于细胞质，可使不同底物去乙酰化从而参与多种生物学过程[5-6]。Li 等[7]研究发现Sirt2 可促进肠道细胞增殖和分化。此外，Sirt2还可调控细胞凋亡。Xu 等[8]研究发现抑制牛老化卵母细胞中的Sirt2 表达可诱导卵母细胞凋亡。Wang 等[9]研究发现Sirt2 可使FOXO3a 去乙酰化，从而激活氧化应激条件下细胞的抗氧化防御系统。另有研究表明，Sirt2 能够参与调控牛颗粒细胞类固醇激素分泌[10]；在牛卵丘卵母细胞复合体（COCs）中，Sirt2 可参与维持卵丘细胞与卵母细胞间的缝隙连接间信息通讯[11]。但Sirt2 是否在绵羊卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡及抗氧化功能中发挥调控作用尚不明确。因此，本研究通过siRNA 干扰的方法敲低绵羊卵巢颗粒细胞Sirt2 表达，检测细胞增殖情况、凋亡相关基因Caspase-3、Bax、Bcl-2与抗氧化相关基因FoxO3a、SOD2、CAT、GPX4的表达及细胞内ROS 水平变化，为进一步研究Sirt2在雌性生殖功能中发挥的作用奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 实验材料 胎牛血清（FBS，以色列BI 公司），胰蛋……