王龙海,吴 鹏,王国权,方正清

(安徽中医药大学中西医结合学院，安徽 合肥 230012)

石斛属于多年生草本植物，是中国常用的名贵中药材。中国有记载的石斛有83种，其中近40种为药用石斛。石斛的功效以益胃生津、滋阴清热为主，但近年来研究发现，石斛具有延缓衰老、调节免疫、缓解糖尿病及其并发症、抑制肿瘤、抗氧化等方面的药理作用。霍山石斛是安徽省道地药材，是石斛的上品，2020年被正式载入《中华人民共和国药典》，其功效研究有待进一步加强。上述石斛功效的研究基本上围绕石斛的主要成分展开，且其延缓衰老的机制也未被完全阐明，罕有对石斛全药的研究，而临床上用石斛防治衰老时大多采用其全药。因此，探讨石斛全药延缓衰老的作用及机制具有重要意义。本研究拟构建C57BL/6小鼠衰老模型，从小鼠学习记忆能力、海马超微结构和活动调节性细胞骨架相关蛋白(activity-regulatedcytoskeleton-associated protein，Arc)表达方面探讨霍山石斛延缓衰老的作用及其机制。

1 材料

1.1 动物 雌性SPF级C57BL/6小鼠，8周龄，由北京唯尚立拓科技有限公司[生产许可证号：SCXK(京)2016-0009]提供。每笼3～5只群养，喂养环境的明暗周期为12 h(7:00 开灯，19:00关灯)，室温(22±2)℃，湿度(55±10)%。

1.2 药材 霍山石斛购自安徽安中大道地中药材开发有限责任公司，经安徽中医药大学刘劲松教授鉴定为正品。参照文献[4]的方法将石斛打粉，过100目筛，用蒸馏水配制成质量浓度为0.14 g/mL的混悬液，置4 ℃冰箱待用。给药前加热至室温，搅拌均匀。

2 方法

2.1 给药方法 参考文献[5-6]的方法确定C57BL/6小鼠早期和晚期给药时间。……