杜希扬，赵治勇，彭善祥，高立虎，李 强，孙兆祥，公素琴

（山东省临沂市中医医院，山东 临沂 276002）

毛茛科铁线莲属植物在我国种类繁多，分布极广[1]。作为中药威灵仙的来源，《中国药典》仅收录威灵仙ClematischinensisOsbeck、棉团铁线莲ClematishexapetalaPall.或东北铁线莲Clematis manshuricaRupr，但全国范围内威灵仙用药比较混乱[2]。第四次全国中药资源普查中课题组发现，山东境内铁线莲属植物主要为长冬草Clematishexapetalavar.tchefouensis和太行铁线莲Clematis kirilowiiMaxim.。孙兆祥[3]通过生药学鉴定研究发现，太行铁线莲与威灵仙有着诸多共同特征，并预测其主要成分类似。徐凌川等[4]对山东省太行铁线莲薄层研究，发现其化学成分与威灵仙相似，具有潜在的药用价值。研究[5-7]通过对贵州地区威灵仙主要来源柱果铁线莲ClematisuncinataChamp.的HPLC指纹图谱分析，发现其与药典收录品种威灵仙亲缘较近。为了进一步研究长冬草、太行铁线莲与药用威灵仙的内在关系，开发山东中药资源，本课题组对其展开HPLC液相指纹图谱的研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器

美国赛默飞高效液相色谱仪：UltiMate3000系列，WondaSil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），AUW120D精密电子天平（SHIMADZU公司）。

1.2 试药

威灵仙对照药材（中国食品药品检定研究院，批号：121189-201102），威灵仙（棉团铁线莲）对照药材（中国食品药品检定研究院，批号：121578-201202），长冬草（采挖自罗庄区黑石山），太行铁线莲（采挖自罗庄区黑石山），磷酸、乙腈为色谱纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

流动相：采用乙腈（A）-0.2%磷酸水（B）进行线性梯度洗脱，0～25 min（A：0.1%～4%）；25～ 30 min（A：4% ～ 13%）；30～ 60 min（A：13% ～ 25%）；60～ 80 min（A：25%～40%）；80～100 min（A：40%～60%）；100～ 120 min （A：60% ～ 80%）；120～ 140 min（A：80% ～ 100%）；140～ 160 min（A：100%～100%），体积流量：0.8 ml·min-1；柱温：25℃；检测波长：210 nm；运行时间：160 min。

2.2 供试品溶液制备

对照药材及采挖药材，分别粉碎，各取粉末（过5号筛）1.0 g，精密称定，置50 mL具塞锥形瓶中，加入甲醇适量，超声提取30 min，放冷，用甲醇定容至50 mL，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液作为供试品溶液。……