用HPLC法测定红茴香注射液中槲皮苷的含量
2021-10-18陈向梅中国人民解放军总医院医疗保障中心药剂科北京100048
成 程,陈向梅,马 健,赵 氚 (中国人民解放军总医院医疗保障中心药剂科,北京 100048)
红茴香注射液是由红茴香根皮经提取制成的灭菌水溶液,具有消肿散瘀,活血止痛作用。临床用于腰肌劳损,关节或肌肉韧带伤痛等。总黄酮是红茴香注射液的主要成分。原标准以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定总黄酮的量,专属性不强。故笔者参考《中国药典》[1],以槲皮苷为测定对象,采用HPLC法测定红茴香注射液中槲皮苷的含量[2-5]获得满意结果, 现报告如下。
1 仪器和试药
1.1 仪器
Agilent 1100系列型高效液相色谱仪;HPChemstation色谱工作站。
1.2 试药
乙腈为色谱纯,其他试剂均为分析纯。槲皮苷对照品由中国药品生物制品检定所提供 (批号:111538-200301,含量测定用), 红茴香注射液由浙江泰康药业有限公司提供(批号:20040730)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(25∶75),流速1.0 ml/min,柱温 30 °C,检测波长256 nm,进样量为10 μl。色谱柱的理论塔板数按槲皮苷峰计算大于3 000。
2.2 溶液制备
2.2.1 对照品溶液
精密称取槲皮苷对照品(120 ℃减压干燥至恒重)适量, 加甲醇制成每1 ml含0.1 mg 的溶液, 摇匀, 即得。
2.2.2 供试品溶液
精密吸取本品3 ml,置25 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取滤液作为供试品溶液。
2.2.3 阴性对照溶液
取辅料作为缺样空白样品,按“2.2.2”项下方法制备。
2.3 专属性试验
分别取阴性对照溶液,对照品溶液及供试品溶液适量,滤过取续滤液 10 μl 注入 HPLC 仪,分别记录色谱图。实验结果表明,该方法专属性良好,阴性对照无干扰,结果见图1。
2.4 线性关系考察
精密称取经减压干燥24 h的槲皮苷对照品适量,加甲醇配成每l ml含槲皮苷0.215 0 mg的对照品溶液。……
