丁苯酞减轻H2O2诱导的人脐静脉和脐动脉内皮细胞氧化损伤
2021-10-15杨晓丽张艳茹冀静静王孟帅
杨晓丽,王 征,张艳茹,冀静静,王孟帅
(1.河北工程大学附属医院 神经内科,河北 邯郸 056002;2.邯郸市第一医院 重症医学科,河北 邯郸 056002;3.邯郸市第二医院 内分泌科,河北 邯郸 056001;4.邯郸市第二医院 神经内科,河北 邯郸 056001 )
内皮功能障碍在动脉粥样硬化的病理生理过程中起着关键作用[1-2],其发生机制包括氧化应激[3]。动脉粥样硬化与卒中、心肌梗死及肾脏病变等多种疾病密切相关。因此研究如何保护内皮功能至关重要。在研究内皮功能时一般选用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothelial cells,HUAECs)主要用于动脉粥样硬化的体外研究,但因HUAECs的培养难度较大,以往研究选用的较少。因内皮功能与动脉粥样硬化密切相关,因此同时选用两种内皮细胞研究内皮功能可使得到的结果更加可靠。
丁苯酞主要用于治疗急性缺血性卒中[4],也可抑制神经元凋亡[5]。但丁苯酞是否具有内皮保护作用目前研究较少。本实验主要研究氧化应激对血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)造成的影响以及丁苯酞是否具有内皮保护作用及其作用机制,为保护内皮功能寻找新的方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞:人脐静脉内皮细胞(HUVECs)(上海吉凯基因细胞库),人脐动脉内皮细胞(HUAECs)(北纳创联生物科技有限公司)。
1.1.2 主要试剂:DMEM培养基和10%胎牛血清(Gibco公司);H2O2(河北健宁药业有限公司);丁苯酞(石药集团恩必普药业);MTT(Biosharp公司);罗丹明123和Annexin V/PI凋亡细胞检测试剂盒(上海碧云天生物科技有限公司);Fura-4/AM(Sigma-Aldrich公司)。
1.2 方法
1.2.1 细胞的培养及分组处理:将HUVECs和HUAECs培养于含10%胎牛血清,100 U/mL青霉素-链霉素溶液的高糖DMEM培养基中,在37 ℃,5% CO2培养箱中进行培养。……
