葛 亮，向悦华，谭 旎

(恩施土家族苗族自治州中心医院 呼吸与危重症医学科，湖北 恩施 445000)

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension，PAH)主要特征表现为肺血管收缩增强和肺血管结构重建，低氧会造成PAH压力持续存在，是肺血管重建病理基础[1]，因此缓解血管重构对于PAH至关重要。核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2)在抗氧化中发挥重要作用，活化Nrf2可上调下游靶标，发挥抗氧化作用，改善内皮细胞紊乱，参与血管重构过程[2]。Nrf2/抗氧化反应元件(antioxidant response element，ARE)信号通路可调控下游靶基因磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1(NADPH quinineoxidoreductase-1，NQO-1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase1，HO1)发挥抗氧化应激和实现对细胞的保护作用[3]。推测Nrf2激活可能通过影响上述通路实现对PAH的保护。因此，低氧诱导建立PAH大鼠模型，观察Nrf2激动剂莱菔硫烷(sulforaphane，SFP)对PAH大鼠的影响并初步探讨其作用机制，以期为临床治疗PAH提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物：雄性SPF级大鼠，体质量180～220 g[北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2017-0013]。饲养条件：光照/黑暗(12 h/12 h)、温度(23±1)℃、湿度(55±5)%，自由饮水饮食。本研究经恩施土家族苗族自治州中心医院动物伦理委员会审核并批准(文号：2019000412)。

1.1.2 试剂：SFP(TRC公司)；HE试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、超氧化物岐化酶(SOD)检测试剂盒、胞质和核蛋白提取试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；一抗兔抗Nrf2、NQO1、HO1(Abcam公司)；一抗兔抗ARE(Santa Cruz公司)；基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMP)-2、MMP-9引物(由上海生工生物工程股份有限公司合成)。

1.2 方法

1.2.1 动物的分组：将大鼠分为对照组、低氧组、Nrf2激活组，每组8只。Nrf2激活组低氧处理前一周每天灌胃5 mg/kg SFP，连续4周，低氧处理：低氧大鼠饲养舱灌入氮气，维持氧浓度于10%±0.5%，每天8 h，每周6天，共3周复制PAH模型。……