吴 娜，王 东，李京敏，白咸勇

(滨州医学院 基础医学院 组织学与胚胎学教研室，山东 烟台 264003)

根据2018年最新统计，肝癌是世界范围内常见癌之一，也是癌相关死亡的第四大原因[1]。虽然肝癌的诊断技术和治疗方法取得很大进步，但是5年生存率仍然很低。因此，寻找有效无毒的方案对治疗肝癌迫在眉睫。在大多数肝癌患者中发现TGF-β 表达升高，并与其受体相互作用，激活细胞内TGF-β信号通路[2]。在肿瘤细胞中激活该通路可诱导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)，上皮细胞失去底侧极性和细胞间黏附功能，出现间充质细胞的运动特征，使大量肿瘤细胞具备转移和侵袭的能力[3]。羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)是从红花中提取的单查尔酮类结构化合物[4]。HSYA主要通过抑制血管生成，对肝癌和胃癌有直接的抗肿瘤作用[5]。本研究将通过体内体外实验研究 HSYA 对肝癌细胞迁移与侵袭的影响，从而为治疗肝癌提供新思路。

1 材料与方法

1.1 实验材料

SPF级裸小鼠，5周龄，雄性，12只，体质量18～22 g[济南朋悦实验动物繁育有限公司，合格证号：SCXK(鲁)20190003]；人肝癌细胞系Huh7(成都飞欧尔生物科技有限公司)；羟基红花黄色素A(上海源叶生物科技有限公司)；胎牛血清(Gibco公司)；DMEM 高糖培养基(HyClone公司)；山羊血清工作液、免疫组化试剂盒(兔二步法)、DAB 显色试剂盒和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔 IgG (二抗)(北京中杉金桥生物技术有限公司);兔抗 TGF-β1 单克隆抗体(中国Proteintech 公司)、兔抗vimentin和 E-Cadherin单克隆抗体(Cell Signaling Technology公司)；ECL发光液(上海诺伦生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞的分组及处理：将人肝癌Huh7细胞培养于含10% FBS的DMEM培养基中，取对数增殖期细胞用于实验。……