陈虎虎，李博萍，邱 倩，周姣含

(1.陇东学院 岐伯医学院，甘肃 庆阳 745000；2.庆阳市第二人民医院，甘肃 庆阳 745000)

铜绿假单胞菌(PAE)属于革兰阴性杆菌，是一种非发酵菌，它是导致医院发生感染的最常见病菌，在空气、水、土壤等自然环境中广泛分布，常定植在健康人群的胃肠道、呼吸道、黏膜、皮肤等位置，当人的机体免疫力下降时，该病菌容易侵入人体引发医院感染[1]。PAE是重症监护病房(ICU)以及呼吸科医院感染的主要病菌，由于其存在易耐药、变异、定植等复杂特征，在临床抗菌药物中属于有难度的问题。国外相关报道显示，因为PAE感染导致死亡的概率大约为5.1%，随着肿瘤化疗、免疫抑制剂、抗菌药物等药物的广泛使用，医院的感染途径、易感人群、感染源明显增多，医院感染呈逐渐加重的趋势[2]。因此，对铜绿假单胞菌的分布情况与耐药性进行分析，对临床防治铜绿假单胞菌引发的医院感染有重要的意义。此次研究主要是为了分析医院铜绿假单胞菌分布及耐药性分析情况，以便为临床提供一定的参考，研究如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年1月-2019年1月陇东学院附属医院住院患者的各种病原菌培养标本5286份，对所有标本进行培养、鉴定、药敏试验，分析铜绿假单胞菌分布和耐药性。5286份标本主要来源于胸腹水、分泌物、脓液、尿液、血液、痰液。标本分离严格按照相关要求进行。质控菌株铜绿假单胞菌(ATCC27853)由浙江省临床检验中心提供。菌株鉴定、分离仪器为半自动细菌鉴定、药敏分析仪(ATBExpression型)，药敏卡(ATBPSE5)、鉴定卡(IDGN5)均由法国梅里埃公司提供。鉴定板(API20NE)、琼脂(MH)均由法国梅里埃生物公司生产；药敏纸片、麦康凯平板、血平板由杭州天和微生物公司生产。患者均知晓同意此次研究，研究得到伦理委员会审批。

1.2 方法

1.2.1 细菌培养、鉴定

对标本操作按照相关规程严格进行[3]。标本接种麦康凯平板、血平板，将其放置到二氧化碳孵箱中进行培养，温度设定为35℃，对培养的优势菌进行分离与鉴定。

1.2.2 药敏试验

使用琼脂纸片扩散法(K-B法)对13种抗菌药物的耐药性进行判断，结果按照相关的标准进行[4]。

1.3 观察指标

(1)分析病原菌分离情况。

(2)分析医院铜绿假单胞菌分布情况。

(3)分析不同科室铜绿假单胞菌分布情况。

(4)分析铜绿假单胞菌对常用的抗菌药物耐药情况。

2 结果

2.1 病原菌分离情况分析

5286份本中，共分离出铜绿假单胞菌1064株，分离阳性率为20.1%。

2.2 医院铜绿假单胞菌分布情况分析

1064株铜绿假单胞菌中，标本主要为痰液(71.0%)、创伤分泌物(10.2%)、中段尿(6.2%)、胸腹腔积液(5.5%)，其他的标本分布比较少，见表1。

表1 医院铜绿假单胞菌分布情况分析(株，%)

2.3 不同科室铜绿假单胞菌分布情况分析

1064株铜绿假单胞菌中，主要分布在呼吸内科(19.6%)、ICU(13.3%)、老年病科(13.0%)、泌尿外科(5.9%)，其他的科室分布比较少，见表2。

表2 不同科室铜绿假单胞菌分布情况分析(株，%)

2.4 铜绿假单胞菌对常用的抗菌药物耐药情况分析

耐药性较高的药物主要有头孢噻肟(58.5%)、环丙沙星(50.0%)、庆大霉素(50.8%)、复方新诺明(84.8%)；敏感度较高的药物主要有阿米卡星(30.5%)、头孢他啶(32.2%)、哌拉西林/他唑巴坦(35.6%)、头孢哌酮/舒巴坦(13.5%)、亚胺培南(11.8%)，见表3。

表3 铜绿假单胞菌对常用的抗菌药物耐药情况分析(株，%)

3 讨论

铜绿假单胞菌广泛存在于自然界中，在全国耐药监测中发现铜绿假单胞菌排首位[5]。该病菌可以通过多种方式、多种途径对身体的部位进行感染，临床治疗难度比较大，很难将其彻底清除，且会出现多重耐药菌株，容易引发医院严重感染[6]。

铜绿假单胞菌出现多重耐药与临床药物滥用有很大的关系[7]。铜绿假单胞菌对不同的抗生素所产生的耐药机制是不相同的，一般是多种耐药机制综合作用的结果，这对临床抗菌治疗造成了一定的难度，其最主要的耐药机制为：(1)产生抗生素修饰酶、灭活酶，比如氨基糖苷钝化酶、B-内酰胺酶等[8]。(2)对抗菌药物的作用靶点进行改变，逃避抗菌药物的作用。(3)主动外排、膜屏障功效及外膜的通透性的明显下降，使得某些蛋白丧失或者是缺乏。(4)生物膜产生。近年的临床研究显示，细菌生物膜在铜绿假单胞菌感染中大量存在，是导致抗菌治疗无效的重要因素[9]。

研究显示，5286份标本中，共分离出铜绿假单胞菌1064株，分离阳性率为20.1%，阳性标本主要来源于痰液(71.0%)、创伤分泌物(10.2%)、中段尿(6.2%)、胸腹腔积液(5.5%)，其他的标本分布比较少，这与其他学者的结果基本一致。结果显示铜绿假单胞菌引发的感染主要为肺部感染，其次为手术后或者是外伤后导致的创面感染，免疫功能较低或者是重症患者也比较容易发生尿路感染。另外，1064株铜绿假单胞菌中，主要分布在呼吸内科(19.6%)、ICU(13.3%)、老年病科(13.0%)、泌尿外科(5.9%)，其他的科室分布比较少，这与ICU患者的病情一般比较危重，患者的机体免疫力明显降低，加之侵入性治疗与操作、多种抗菌药物的使用等有关，使得ICU患者成为铜绿假单胞菌的易感人群。而呼吸内科的患者由于呼吸系统存在异常使得呼吸道防御能力明显下降，使得呼吸内科患者也成为铜绿假单胞菌的易感人群，同时，可能与这些科室老年患者较多也有关系[10]。

在铜绿假单胞菌对常用的抗菌药物耐药情况分析中，研究显示，耐药性较高的药物主要有头孢噻肟(58.5%)、环丙沙星(50.0%)、庆大霉素(50.8%)、复方新诺明(84.8%)；敏感度较高的药物主要有阿米卡星(30.5%)、头孢他啶(32.2%)、哌拉西林/他唑巴坦(35.6%)、头孢哌酮/舒巴坦(13.5%)、亚胺培南(11.8%)，因此，在治疗由于铜绿假单胞菌引发的感染中要避免再次使用已经产生耐药的药物。阿米卡星属于半合成氨基糖苷类药物的一种，它对不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等抗菌效果较好。它可以维持相关酶生物活性的稳定，在治疗卡那霉素、庆大霉素耐药患者中有明显的效果。亚胺培南属于碳青酶烯类药物的一种，抗菌活性较高，它可以作用于细菌的结合蛋白，且与其亲和力较高，是临床上治疗铜绿假单胞菌感染患者的主要抗菌药物，但是通常不会单独使用，需要将其与西司他汀联合使用，可使亚胺培南在肾脏处不受破坏，同时减轻肾脏毒性[11]。但是，临床上随着碳青酶烯类药物的广泛使用或者是过度使用，耐药菌株明显增多，因此，限制或者是减少该类药物的临床使用是降低耐药性的重要措施。同时，临床上应该根据细菌培养结果与药敏试验结果选择合适的抗菌药物，如果患者的感染比较严重，则要联合使用抗菌药物进行治疗。

近几年，铜绿假单胞菌引发的临床感染逐渐增加，导致感染增加的原因主要有：(1)临床上虽有相关的规章制度来规定抗菌药物的使用，但是，很多临床医生只是凭借自己的临床经验为患者使用抗菌药物，没有根据细菌培养、药敏试验结果对患者进行合理的治疗，使得最终的感染率、耐药性明显提高[12]。(2)近年临床上使用的广谱抗菌药物明显增多，这容易使患者的机体菌群失去平衡，导致继发感染的发生。(3)随着我国人口老龄化现象的不断增加，医院中的床位明显增多，住院患者也明显增多。(4)铜绿假单胞菌的生长、繁殖能力非常强，且对生长的环境要求不是很高，对很多的药物存在天然的耐药性，这就使得临床交叉感染发生率明显提高[13]。为了更好地控制医院铜绿假单胞菌的感染，预防细菌耐药性，建议临床上及时采取有效的措施进行预防，医务人员要时刻注意手卫生，消毒隔离工作要做好，对医院内的感染进行控制，提高对铜绿假单胞菌的耐药性检测，尽早进行细菌培养、鉴定、药敏试验，禁止长时间或者是过度使用同一种类型的抗菌药物，并对临床抗菌药物的使用方法进行规范，以便降低耐药菌的产生[14]。简言之，医院铜绿假单胞菌引发的感染是可以控制与预防的。各科室要根据送检标本的细菌培养与药敏试验结果选择合适的抗菌药物，要对使用情况进行密切的监测，同时要合理控制抗菌药物的使用量，以便降低院内因为铜绿假单胞菌引发的感染。另外，应定期对科室中的病菌分布、耐药菌发展情况进行统计与分析，以便更好地控制与预防院内感染的发生。

此次研究的不足：此次研究时间比较短，样本数量比较少，得到的结果可能存在一定的不准确性与局限性，在今后的研究中，我们会进行大样本、更深入的研究，以便对本次研究结果的准确性进行证实，希望本次研究可以为其他学者提供一定的参考价值。

综上所述，医院铜绿假单胞菌引发的临床感染明显增多，临床检出率明显提高，但是随着药物的耐药性提高，临床上应该加强药物的耐药性监测，合理使用抗菌药物，以便降低细菌的耐药性。