三重四极杆液质联用技术建立检测血清中胰岛素样生长因子1的定量方法研究
2021-10-13河春姬申利
河春姬 申利
1 北京体育大学(北京100084)
2 国家体育总局反兴奋剂中心(北京100029)
生长激素(growth hormone,GH)和胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-Ⅰ)因具有蛋白同化作用,被列入世界反兴奋剂机构(World Anti-Doping Agency,WADA)禁用清单[1]。WADA颁布的体育项目特殊检测技术文件(technical document for sport specific analysis,TDSSA)[2]明确了GH 将作为运动员生物护照(athlete biological passport ,ABP)内分泌模块的检测项目,IGF-Ⅰ作为GH 检测的一个重要间接指标,成为ABP 内分泌模块的检测指标之一被长期监测。目前对IGF-Ⅰ的检测,普遍采用WADA实验室生长激素间接法指南(laboratory guidelines human growth hormone(hGH)biomarkers test,GH Biomark⁃ers)[3]指定的酶免化学发光自动检测平台系统。但由于检测过程自动化和商品化程度较高,一旦国际标准物质发生更迭,而生产厂家不能及时推出替换产品,原有检测系统将无法继续使用,既易造成巨大浪费,又影响该项目兴奋剂检测的持续开展。
质谱方法检测因其指纹式识别特性一直是反兴奋剂研究中的重要检测手段。指纹式识别,即将待测样品与已知标准品的特征离子(对)质荷比进行对照来确认样品中是否存在该物质。近些年来随着仪器检测技术的不断革新,质谱法检测肽类物质的研究和应用也不断增多。由于质谱方法可用于多种物质的检测,降低单个物质的检测成本,同时检测方案更加灵活,检测结果稳定可靠,更适合作为兴奋剂常规检测方法进行开发和应用,其中三重四极杆液质联用( liquid chro⁃matography triple-quadrupole mass spectrometry,LCQQQ)技术是目前广泛采用的定量检测生物大分子的技术之一。
兴奋剂IGF-Ⅰ的质谱检测方法国内尚无报道。国际兴奋剂检测领域对于IGF-Ⅰ的LC-QQQ方法研究一般采用自下而上的策略[4-8],即对水解后的IGF-Ⅰ特征片段进行质谱定量分析。……
