袁娣，邵怡，张同瑶，姜阜杉，李秀荣，宋淇淇，通信作者

刚地弓形虫截短型基因的克隆及原核表达质粒的构建

袁娣1，邵怡1，张同瑶1，姜阜杉1，李秀荣2，宋淇淇1，通信作者

（1.天津农学院 动物科学与动物医学学院 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室，天津 300392；2.巴彦淖尔市临河区农畜产品质量安全中心，内蒙古自治区 巴彦淖尔 015000）

为构建刚地弓形虫基因原核表达质粒，利用SignalP-5.0软件预测信号肽序列，去除前端信号肽序列，设计引物并扩增截短型基因序列，克隆并构建原核表达质粒。结果显示：基因前51位氨基酸为信号肽区域，故将此段信号肽序列切除，获得长度为 966 bp的截短型基因片段（SRS29Ccut），成功构建原核表达质粒pET-28a-SRS29Ccut和pET-32a-SRS29Ccut。此研究为今后对刚地弓形虫SRS29C蛋白的生物学功能及免疫特性进行更深入研究打下基础。

刚地弓形虫；；截短型基因；原核表达质粒

刚地弓形虫是一种重要的人畜共患寄生虫，可以感染包括人在内的几乎所有温血动物[1]。弓形虫病具有极高的感染率，其感染主要是由不良或不干净的饮食习惯和不合理饲养宠物等引起，人通过误食未煮熟的含有弓形虫包囊或速殖子的畜禽肉食或接触感染猫粪便中的卵囊而感染[2]。免疫功能正常的人类感染弓形虫后一般没有明显症状，而免疫功能亢进患者感染后可能患脑炎，免疫功能受损的感染患者和经胎盘获得弓形虫的先天性弓形虫病患者可能发生严重疾病，且如果在怀孕期间感染会导致孕妇流产、死产或畸胎[3]。……