田爱现，马剑雄，马信龙△，李岩

骨骼肌的功能与其肌纤维的数量和体积有关，当骨骼肌出现萎缩时，其质量会相应减少，机体的运动系统功能也会受到明显影响，从而影响患者的身体健康，降低生活质量，老年患者尤为明显［1］。当前对骨骼肌萎缩的研究已成为热点。药物治疗以其独特的优势与良好的疗效在防治骨骼肌萎缩方面发挥着重要作用。阿仑膦酸钠（Alendronate，ALN）作为第3代双膦酸盐药物，可有效抑制骨吸收，维持骨量，是治疗原发性及继发性骨质疏松的一线药物［2］。ALN除了可治疗骨质疏松症外，还能明显增加骨骼肌质量［3］，并能通过提高自噬、抑制骨骼肌蛋白降解等途径抑制骨骼肌萎缩［4-5］。本研究以地塞米松（Dexamethasone，Dexa）诱导C2C12细胞肌小管萎缩，通过体外细胞实验探讨ALN在骨骼肌萎缩中的作用及机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料及仪器 阿仑膦酸钠（Merck Sharp&Dohme Italia SPA，国药准字J20130085，600 mg/片）；地塞米松购自Sigma公司；DMEM培养基、胎牛血清购自Gibco公司；4%中性多聚甲醛固定液、HE染色试剂盒、免疫组化试剂盒为武汉赛维尔生物科技有限公司产品；微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Beclin-1、肌球蛋白重链（MHC）抗体，肌肉特异性环指蛋白1（MuRF1）单克隆抗体及辣根过氧化物酶（HRP）标记的对应二抗均购自英国Abcam公司；CCK-8检测试剂盒（碧云天生物技术有限公司）。酶标仪（Rayto，RT6100），离心机（大龙，D3024R），成像系统（上海天能科技有限公司，Tanon-1600R），光学显微镜（日本，Nikon EclipseE100），Western blot电泳仪（Bio-Rad公司，美国）。

1.2 研究方法

1.2.1 C2C12细胞培养、分化和分组 C2C12肌细胞来源于天津市骨科研究所，培养于含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基，添加1%青霉素和链霉素（生长培养基），细胞置于37℃、5%CO2孵箱，48 h更换生长培养基。……