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促红细胞生成素对低出生体质量新生大鼠缺氧缺血后脑神经细胞凋亡的影响

2021-10-12王超姜红春刘丹

安徽医药 2021年10期

王超,姜红春,刘丹

在儿童早期防治成人期疾病已经成为世界范围的热点和趋势,新生儿体质量过低可能会导致缺氧缺血性脑病(HIE)。HIE是在围生期窒息引起的脑血流减少导致的脑损伤。目前我国新生儿HIE发病率高达3%~10%,虽然因地区不同而不同,但由此引起的行为障碍严重影响我国人口素质的提高。促红细胞生成素(EPO)作为一种能够调节血细胞生成的细胞因子,目前可以由人工合成与天然相同氨基酸序列的糖蛋白,其能缓解脑部损伤,降低相关凋亡蛋白的合成保护HIE病人的脑神经细胞。但目前关于EPO对缺氧缺血后脑神经细胞凋亡的影响机制尚不能完全统一。2019年1—8月进行本研究,旨在观察EPO对低出生体质量新生大鼠缺氧缺血后脑神经细胞凋亡的影响,以期了解为临床研发HIE新药提供数据资料。

1 材料与方法

1.1 材料

低出生体质量(LBW)新生SD大鼠80只,SPF级,体质量(4.0±0.2)g,购自广东省医学实验动物中心[SCXK(粤)2018-0002]。饲养温度20~25℃,相对湿度50%~65%,本研究符合一般动物实验伦理学原则。

1.2 药物与试剂

EPO(纯度>99.9%)购自上海凯茂生物医药有限公司;TUNEL细胞凋亡检测试剂盒购自Roche公司;中性福尔马林、酒精、二甲苯购自天津科密欧有限公司;B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)抗体(货号sc-7382,批号20190201)、Bcl-2相关X(Bax)抗体(货号sc-7480,批号20190301)购自美国Santa Cruz Biotechnology公司;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)(1∶500,货号201872169)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)(货号2018630258)购自武汉华联科有限公司;辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗兔免疫球蛋白G(IgG)、HRP羊抗鼠IgG等二抗购自美国Thermo公司;Annexin V-FITC/PI试剂盒购于杭州四季青生物工程材料有限公司;……
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