谭定春，秦惠何

结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，近些年的发病率和死亡率均呈现上升趋势，严重威胁人类的生命健康。肿瘤的发生发展受肿瘤微环境中多种因素的调控，这些因素包括细胞内源性因子和外源性因素，如局部浸润的免疫细胞、肿瘤细胞分泌的促炎因子等。淋巴细胞是肿瘤微环境的重要组成成分，影响肿瘤的进展和预后，自然杀伤细胞（NK）是固有免疫细胞之一。结肠癌肿瘤组织中NK细胞数明显低于临近的正常组织，这说明肿瘤微环境中的调控因子不足以将NK细胞募集到肿瘤组织。2型人类表皮生长因子受体（HER2）是人类癌基因之一，在成人组织中几乎不表达，而在多种肿瘤中呈现高表达。有研究显示，结直肠癌中HER2表达升高，RNA干扰HER2表达可抑制癌细胞增殖；NK-92细胞联合靶向HER2基因的siRNA可抑制卵巢癌细胞在体内及体外增殖，提示HER2可能在NK细胞的局部浸润中发挥调控作用。NK92细胞与NK细胞具有相似的表面分子特征和功能特点，是一种理想的肿瘤生物治疗的细胞系。王洋研究显示，半乳糖凝集素-9（galectin-9）基因可通过影响NK92细胞F-肌动蛋白（F-actind）的极化，调节NK92细胞的趋化引动。目前，HER2对NK细胞局部浸润的影响还未知。鉴于此，本研究于2018年5—11月进行实验，旨在探讨HER2对结直肠癌NK细胞局部浸润的影响及作用机制。

1 材料与方法

1.1 试剂和仪器

杜尔伯格伊戈尔培养基（DMEM）、胎牛血清（FBS）均购自美国Gibco；HER2和β-连环蛋白（β-catenin）抗体均购自美国CST；重组HER2购自美国R&D；二喹啉甲酸（BCA）试剂盒购自中国碧云天；……