常晓苗

近年来出现的靶向治疗是甲状腺癌新型治疗手段，为难治性甲状腺癌的治疗提供了广阔前景。研究发现长链非编码RNA（lncRNA）、微RNA（miRNA）均可作为甲状腺癌早期诊断和预后的生物标志物以及靶向治疗的新靶点。研究发现长链非编码小核仁RNA宿主基因7（lncRNA SNHG7）在膀胱癌组织和细胞中过表达，下调lncRNA SNHG7可以抑制膀胱癌细胞的恶性生物学行为。沉默lncRNA SNHG7可抑制Fas凋亡抑制分子2（FAIM2）蛋白水平，抑制细胞增殖，迁移和侵袭，加速肺癌细胞凋亡。微小RNA-331-3p（miR-331-3p）促进肝细胞癌的增殖和转移。miR-331-3p在结直肠癌组织和细胞中下调表达可抑制增殖并促进细胞凋亡。但lncRNA SNHG7和miR-331-3p对甲状腺癌的发生发展影响还尚未清楚。本研究旨在研究lncRNA SNHG7和miR-331-3p对甲状腺癌发生发展的影响及SNHG7是否调控miR-331-3p。

1 资料与方法

1.1 一般资料

人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1和人甲状腺癌细胞K1、BCPAP、TPC-1购自中国科学院上海细胞库；RPMI-1640培养基（美国Gibico公司）；荧光定量PCR试剂盒（日本TaKaRa）；Transwell小室、基质胶（美国BD公司）；四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）试剂盒、放射免疫沉淀分析（RIPA）蛋白裂解液盒（上海碧云天）。本研究起止时间为2018年1月至2019年2月。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养与分组人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1和人甲状腺癌细胞K1、BCPAP、TPC-1用RPMI-1640培养基于37℃、5%二氧化碳条件下培养；取对数生长期细胞TPC-1，将其分为si-NC组（转染SNHG7干扰表达载体阴性对照）、si-SNHG7组（转染SNHG7干扰表达载体）、pcDNA组（转染SNHG7过表达载体阴性对照）、pcDNA-SNHG7组（转染SNHG7过表达载体）、si-SNHG7+anti-miR-NC（共转染SNHG7干扰表达载体和miR-331-3p抑制剂阴性对照）、si-SNHG7+anti-miR-331-3p组（共转染SNHG7干扰表达载体和miR-331-3p抑制剂）；正常培养的细胞作为空白对照组。

1.2.2 qRT-PCR检测miR-331-3p和SNHG7 mRNA表达水平提取Nthy-ori 3-1和人甲状腺癌细胞K1、BCPAP、TPC-1以及各组TPC-1细胞的总RNA，合成cDNA后进行PCR扩增，相对表达量采用2法计算。……