张海生，黄河，徐震

非小细胞肺癌（NSCLC）是肺部恶性肿瘤，占全部肺癌的80%～85%，大多数病人确诊时已是晚期且出现转移，手术无法根治，分子靶向药物因其靶向、安全、方便等优点成为研究的热点。研究发现微小RNA（miRNA）参与肺癌细胞的增殖、分化、转移等过程，可作为肺癌的潜在分子靶标及预后生物标志物。研究报道微小RNA-203a-3p（miR-203a-3p）通过抑制LIM和SH3蛋白1（LASP1）抑制鼻咽癌细胞增殖和转移；miR-203a-3p还抑制肝癌细胞的增殖和转移。miR-203a-3p与NSCLC的放疗敏感性相关，但对NSCLC迁移和侵袭的影响尚不清楚。Mink相关肽1（KCNE2或MiRP1）属于KCNE基因家族，作为辅助性β亚基，其产物与离子通道的α亚单位相互作用，发挥不同生理效应，其异常变化可导致梗死后心律失常。有研究发现KCNE2在胃癌组织和细胞中下调表达，KCNE2表达的丧失有助于胃肿瘤的侵袭性生长。然而KCNE2在NSCLC的表达及其是否影响NSCLC的增殖、迁移和侵袭也尚不清楚。本研究主要研究miR-203a-3p是否通过KCNE2影响NSCLC的增殖、迁移和侵袭。

1 资料与方法

1.1 一般资料

正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺癌细胞H1299、SPC-A-1、NC-H446购自中国科学院上海细胞库；RPMI-1640培养基（美国Gibico）；荧光定量试剂盒（日本TaKaRa）；MTT试剂盒（日本同仁研究所）；双荧光素酶报告基因检测试剂盒、RIPA蛋白裂解液（上海碧云天）；Transwell小室、基质胶（美国Corning）；兔抗人KCNE1多克隆抗体、兔抗人细胞周期素依赖蛋白激酶6（CDK6）多克隆抗体、兔抗人细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）多克隆抗体、兔抗人基质金属蛋白酶2（MMP-2）多克隆抗体、兔抗人基质金属蛋白酶9（MMP-9）多克隆抗体、兔抗人β-actin多克隆抗体、山羊抗兔免疫球蛋白（IgG）-辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）购自北京博奥森生物科技有限公司。……