矫璐宇，秦春新，杨小青，于浩，王子良

乳腺癌是女性疾病中常见恶性肿瘤之一，随着 现代生活节奏的加快及生活压力的增大导致乳腺癌呈年轻化发展趋势。研究表明乳腺癌发病机制与细胞周期异常、细胞恶性增殖等密切相关。细胞分裂周期相关蛋白2（CDCA2）可调控细胞周期进程，研究报道指出CDCA2在胰腺导管腺癌组织中表达水平明显升高，敲低CDCA2表达可抑制胰腺癌细胞增殖能力。CDCA2在肺腺癌组织中高表达，其表达量升高可作为肺腺癌患者预后不良的独立预测因子，进一步研究发现抑制CDCA2表达可通过下调细胞周期蛋白E1（CCNE1）而抑制肺腺癌细胞的增殖，而过表达CDCA2通过上调CCNE1促进肺腺癌细胞增殖。但CDCA2在乳腺癌致病机制中的研究尚未见相关报道。慢病毒siRNA干扰具有持续时间长、稳定性高等优点的敲除工具。本研究自2019年2—7月通过慢病毒介导的RNAi技术沉默乳腺癌细胞中CDCA2基因表达，观察其对细胞增殖、凋亡及克隆能力的影响，探讨其在乳腺癌治疗及预防乳腺癌的潜在应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A购自上海昱都生物科技有限公司；乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、BT549购自上海慧颖生物科技有限公司；高度免疫缺陷雄性小鼠（20只），体质量范围为20～30 g，购自北京维通达生物技术有限公司，合格证号：SCXK（京）2017-0008。本研究中对于大鼠的处理符合动物伦理学相关标准。慢病毒LV3-shCDCA2、LV3-shNC均购自上海吉玛制药技术有限公司；RPMI 1640培养基、胎牛血清均购自美国Gibco公司；Trizol试剂购自美国Invitrogen公司；……