张国林，魏星，邢以文，薛满

贝母为百合科植物干燥鳞茎，具有清热润肺、止咳化痰的药理活性。贝母常见品种有川贝母（Fritillariae cirrhosae bulbus）、浙 贝 母（Fritillariae thunbergii bulbus）、平贝母（Fritillarae ussuriensis bulbus）和伊贝母（Fritillariae pallidiflorae bulbus）等。贝母属川贝母止咳化痰效果优于其他贝母，但由于川贝母资源短缺、价格较高，市场上存在掺假掺伪的现象。同时，川贝母多以药材原粉入药，给采用常规方法鉴别带来较大困扰。川贝母ITS区的第75位碱基为C，含有CCCGGG序列的SmaI酶切位点，而非川贝类此位点为T，是CTCGGG序列，无

SmaI

酶切位点。基于此，采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）可以实现从分子水平上对川贝母的鉴别。虽然目前有关于分子生物学方法鉴定川贝母的报道，但关于中药制剂中采用分子生物学方法鉴定川贝母的报道较少。本研究研究起止时间为2019年2月至2019年5月，采用PCR-RFLP法对复方川贝散中的川贝母成分进行分析，并以含有平贝母成分的蛇胆川贝液为对照。

1 材料与方法

1.1 药品

国家药品标准物质川贝母（暗紫贝母）（中国食品药品检定研究院，批次121000～201609）；复方川贝散（处方为川贝母、浙贝母和珍珠）（苏州大学附属儿童医院，批号Z04001116，批次20190307）；蛇胆川贝液（广东一力罗定制药有限公司，批号Z44023603，批次180201）；川贝母（无锡葆寿堂药业有限公司，批次Y181204）；珍珠层粉（苏州工业园区天龙制药有限公司，批号Z32020625，批次CF190206）。

1.2 试剂与仪器

新型快速植物基因组DNA提取试剂盒（离心柱）购自上海捷瑞生物工程有限公司（批号0020170104）；Dream Taq Green PCR Master Mix（2X）购自美国赛默飞世尔科技有限公司（批号00517449）；20μmol引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成（上游引物批号2409103320，下游引物批号2409103319）；……