胡 莎，袁 梦，葛文静，林翠苹，于业志

（1.青岛市粮油质量检测和军队粮油供应中心，山东青岛 266000；2.青岛市食品药品检验研究院，山东青岛 266000；3.青岛菲优特检测有限公司，山东青岛 266000）

真菌毒素污染是威胁粮食安全的重要因素，粮食在种植、加工、储存及流通等环节中可能被真菌毒素污染[1]，最新发布的《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》（GB 2761—2017）规定了谷物及其制品中对黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFT B1）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）、赭曲霉毒素A（Orchatoxin A，OTA）及玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）的限量指标[2-3]，这4种真菌毒素是目前为止认为可能对人们的健康构成较大风险的[3-7]。现在国内外对粮油产品中真菌毒素的检测标准方法一般常见的有胶体金快速检测法[8-9]、薄层色谱法[10]、酶联免疫法[11]、高效液相色谱法[12]及液相液质联用法[13]。

本文旨在建立多功能柱净化、超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小麦中DON、OTA、AFT B1和ZEN共4种真菌毒素的含量。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Agilent超高效液相色谱串联质谱联用仪（UPLC-QQQ 1290-6460，安捷伦科技有限公司）；离心机（Sartorius sigma 3-18k）振 荡 器（Heidolph Multi Reax）；电 子 天 平（Sartorius）；MycoSpinTM 400 Multitoxin净 化 柱（Romer Labs公司）；微型聚四氟乙烯滤膜（0.22 μm）。

超纯水（娃哈哈）；乙腈（色谱纯）、乙酸（色谱纯）、乙酸铵（色谱纯）、甲醇（色谱纯），德国merck公司；标准溶液DON（100.6 mg/L）、ZEN（100.4 mg/L）、AFT B1（100.3 mg/L）、OTA（100.1 mg/L），Pribolab公司。

1.2 实验方法

1.2.1 样品处理

称取25 g（精确至0.001 g）样品于250 mL具塞三角瓶中，加入100 mL乙腈/水（50/50，V/V），放置于震荡器中混合90 min，静置1 min后过滤，吸取10 mL滤液于50 mL聚丙烯离心管中，并加入500 μL乙酸混匀，从混合液中移取750 μL至MycoSpinTM 400净化柱，盖紧净化柱振荡混合1 min，净化柱底端将净化柱放入离心管中，转速10 000 r/min离心30 s，取上清液过0.22 μm滤膜于进样瓶中，待上机检测。……