云南省部分养殖场鸡传染性贫血病毒核酸检测及VP2 基因序列分析

2021-10-10张振兴宋建领

中国动物检疫 2021年10期

关键词：检测

王斌，张振兴，宋建领

（1.威信县动物疫病预防控制中心，云南威信 657900；2.云南省畜牧兽医科学院，云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室，云南昆明 650224）

鸡传染性贫血（chicken infectious anemia，CIA）是由鸡传染性贫血病毒（chicken anemia virus，CAV）引起雏鸡以贫血和免疫抑制为主要特征的传染病，根据临床症状又称鸡蓝翅病、出血综合征，早期也称为鸡贫血因子（chicken anemia agent，CAA），是危害我国家禽养殖的重要垂直传播疫病之一。该病1979 年在日本被首次发现[1]，1992 年在我国被首次确认发生[2]，现今已在全球范围内蔓延[3-8]。2015 年7 月，该病病原被国际病毒分类协会归分于圆环病毒科。CAV 核酸为环状单股负链DNA，基因组大小为2 298 bp 或2 319 bp，编码 VP1、VP2 和VP3 蛋白。其中，VP2 为非结构蛋白，是CAV 最保守蛋白，因此在分子流行病学检测中VP2基因作为PCR 检测的首选基因。为了解近年来CAV 在云南省养鸡场的流行及其VP2基因变异情况，2017—2020 年在昆明市、楚雄州、红河州、玉溪市等家禽养殖密集区，采集样品进行CAV 核酸检测，并对部分阳性样品进行VP2基因序列分析。

1 材料

1.1 病料

2017—2020 年，在昆明市、楚雄州、大理州、红河州、玉溪市等家禽养殖密集区，采集89 个养鸡场的疑似肿瘤疫病病鸡肝脏样品，冷藏送实验室检测。

1.2 主要试剂及仪器

DNA 核酸提取试剂盒、PCR 试剂盒和DL 2 000 DNA Marker 等，均购自大连宝生物公司；超净工作台（型号为LA2-4A1），购自ESCO 公司；PCR 仪（型号为9700），购自美国ABI（Applied Biosystems Inc）公司；凝胶成像系统（型号为2000），购自美国BIO-RAD 公司。