何锡忠，林 鸷，赵本进，彭丽英

（1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海 201106；2.上海佳牧生物制品有限公司，上海 201106）

ST 细胞（猪睾丸细胞）一般用于病毒增殖和分离，广泛适用于猪传染性胃肠炎病毒和猪伪狂犬病病毒（PRV）等病毒的增殖，是猪细小病毒的理想宿主。许多疫苗生产用宿主细胞都实现了大规模、无血清悬浮培养[1-2]。采用悬浮培养ST 细胞，可缩短疫苗生产周期，降低企业生产风险，提高生产效率和产品质量[3-4]；无血清细胞悬浮培养不仅降低了血清生产成本，大量提高细胞数量，也可保证疫苗产品的质量稳定。因此，ST 细胞的大规模悬浮培养具有很大的发展前景。由于细胞培养环境和摇瓶培养系统的不同条件可影响细胞生长代谢和病毒繁殖状况，本试验通过研究细胞接种密度、培养时间、震荡速度和不同摇瓶规格与细胞生长的关系，考察培养过程中的限制性因素对ST 细胞生长的影响；同时研究细胞接种密度、感染量和培养时间与细胞繁殖病毒的关系，确定培养过程中的不同因素对ST 细胞繁殖PRV 的影响，以期为获得生长良好的高密度ST 细胞和提高PRV 繁殖能力提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株和毒株 悬浮ST 细胞株，由上海市农业科学院畜牧兽医研究所猪繁殖障碍病课题组驯化保存；PRV sx-gE 毒株，由上海市农业科学院畜牧兽医研究所课题组保存。

1.1.2 试剂及耗材 ST-S 细胞无血清培养基，由上海源培生物科技股份有限公司提供；125 mL、250 mL、1 L Erlenmeyer flask 摇瓶，购自CORNING 公司。

1.1.3 主要仪器 轨道式振荡器，购自杭州奥盛仪器有限公司；……