钟科 邓天芝 黄大翠

乳腺癌已成为严重威胁世界女性健康的实体恶性肿瘤。对于晚期乳腺癌，尚无有效的治疗手段[1]，肿瘤的复发以及转移是患者死亡的主要原因[2]。研究显示，非编码微小RNA（microRNA，miRNA）在肿瘤的进展中发挥促癌或抑癌的调控功能[3]。miRNA-30b是miRNA-30 家族成员之一，miRNA-30b 表达与结肠癌、前列腺癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤的进展关系密切[4]。Gao 等[5]研究显示，沉默miRNA-30b 的表达，胃癌细胞的增殖与侵袭能力明显增强。但有关miRNA-30b 在乳腺癌中的报道较少。整合素β3（integrin β3，ITGB3）是定位在胞膜上重要的跨膜蛋白受体。研究显示，ITGB3 参与调控乳腺癌细胞的增殖、迁移等生物学过程程[6]。本研究旨在通过对miRNA-30b 和ITGB3 在乳腺癌中的作用进行探讨，为乳腺癌药物的开发提供新的分子靶点。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 组织样本 选择2016年3月至2019年3月144例于成都医学院第一附属医院收治的并均经病理学确诊的乳腺癌患者的组织标本，其中原位乳腺癌51例、浸润性乳腺癌48例和转移性乳腺癌45例，及癌旁组织标本144例，同时收集其临床病理资料。本研究获得本院伦理委员会批准，患者签署知情同意书。

1.1.2 细胞及动物 人乳腺癌MCF-7 细胞株购自美国典型培养物保藏中心。SPF 级雌性BALB/c 小鼠30 只，周龄5～6 周，体质量16～18 g，由本院实验动物研究中心购自成都岐黄博恩生物科技有限公司，动物使用许可证号为SYXK（川）2020-225，并获得医院动物伦理委员会批准。

1.1.3 试剂 miRNA-30b 模拟物、miRNA-NC 和过表达ITGB3（miRNA-30b 模拟物-pc）均购自生工生物工程（上海）股份有限公司。GAPDH 抗体购自美国Jackson 公司；5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）试剂盒、Western blot 试剂盒均购自美国Invitrogen 公司；……