郜亮 贾振宇（长治医学院附属和济医院皮肤性病科，长治046000）

皮肤鳞状细胞癌（cutaneous squamous cell carci‐noma，CSCC）是一种表皮角质形成细胞衍生的皮肤肿瘤，是世界上最恶性的皮肤肿瘤之一［1］。主要表现为一系列的进展性恶性肿瘤，从前体光化角质病到原位鳞状细胞癌、浸润性鳞状细胞癌，最后到转移性鳞状细胞癌［2］。TSPAN1定位于人类染色体1p34.1，属于四跨膜蛋白超家族新成员，在多种肿瘤组织及细胞中均有表达，其机制可能是通过转导细胞分裂的信号或引起细胞异向分化或去分化，导致癌组织细胞增殖或血管生成等，参与癌变和侵袭转移过程［3］。CHEN等［4］发现抑制TSPAN1基因表达能够减少CSCC的增殖、迁移和浸润等恶性生物学行为。本研究从miRNA靶向基因对疾病进展进行调控的角度出发，探讨可能影响TSPAN1表达的miRNA，选中miR-194-5p作为研究点。

miR-194-5p参与乳腺癌、肝癌、胃癌、膀胱癌、卵巢癌等多种肿瘤的生长和转移，其上调往往能够抑制癌细胞的迁移与侵袭等［5-9］。WANG等［10］曾证明miR-194-5p与TSPAN1之间的靶向关系，阐明miR-194-5p作为上游因子调控TSPAN1表达，从而对癌细胞产生影响。但是其在CSCC中的作用并未完全明确。本研究在前人研究的基础上提出假设：miR-194-5p能够靶向抑制TSPAN1的表达进而调控CSCC的进展。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞来源与试剂CSCC A431细胞系购自ATCC细胞库；苏木精-伊红染色试剂盒（G1120）、DAB（DA1010）、RIPA裂解液（R0010）、DEME高糖型培养基（11995）购自索莱宝科技有限公司；兔抗人一抗TSPAN1（ab254730）、Bax（ab32503）、c-myc（ab32072）、Bcl-2（ab32124）、羊 抗 兔IgG二 抗（ab150077）和Annexin V-FITC试剂盒（ab14085）均购自Abcam公司；光镜（37XF-PC）购自上海光学仪器厂；RNA提取试剂盒（10296010）、Lipofectamine2000（11668027）、无血清培养基Opti-MEMI（31985-070）购自Invitrogen公司；PrimeScript RT试剂盒（RR014A）购自宝日医生物科技公司；……