朱琳琳 徐祉轩 张明明（新乡医学院医学检验学院，河南省分子检验与医学检验技术协同创新中心，河南省免疫与靶向药物重点实验室，新乡453003）

前列腺癌（prostate cancer，PCa）发病率逐年升高，现已成为严重威胁亚洲男性健康的第二大恶性肿瘤，但相当一部分患者激素治疗不敏感或耐受，迫切需要寻找抗肿瘤效果明确但不良反应较小的药物。本研究选取的蓝萼甲素（glaucocalyxin A，GLA）是从传统中草药香茶菜中分离提取的活性成分，香茶菜作为中草药，用于清热解毒、抗菌消炎、抗肿瘤历史悠久。研究表明GLA具有良好的抗肿瘤作用，但机制尚不明确［1-4］。本研究检测GLA对人前列腺癌细胞系DU145细胞中周期蛋白B1（cy‐clinB1）、周期蛋白依赖性激酶1（cyclin-dependent ki‐nase1，CDK1）等细胞周期相关因子表达的影响，探讨GLA诱导细胞周期阻滞的作用机制，为GLA的临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料人前列腺癌细胞系DU145细胞购自中科院上海细胞库。胎牛血清、RPMI1640培养液购自Gibco公司；GLA由新乡医学院药学院提供；Trizol试剂、逆转录酶（M-MLV）、实时荧光定量PCR试剂盒购自天根生化科技（北京）有限公司；所用引物均由上海生工生物工程（上海）股份有限公司合成；所用抗体均购自美国CST公司；BCA蛋白浓度检测试剂盒、流式细胞周期检测试剂盒购自江苏碧云天生物技术公司；流式凋亡检测试剂盒购自美国BD公司。

1.2方法

1.2.1 实验分组实验设空白对照组、1 μg/ml、2.5 μg/ml、5 μg/ml GLA组，4组细胞培养基均含10%胎牛血清、100 U/ml双抗（青链霉素），培养环境为37℃、5%CO2。空白对照组不加GLA，其他各组细胞贴壁后分别加入相应浓度GLA刺激培养。……