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miR-124通过靶向Capn4抑制Wnt/β-catenin信号通路调节胃肠道间质瘤(GIST-T1)细胞生物学功能①

2021-09-25支小飞陈思俊华如衡朱建伟南通大学附属医院普外科南通226001

中国免疫学杂志 2021年18期
关键词:检测

支小飞 陈思俊 华如衡 朱建伟(南通大学附属医院普外科,南通226001)

胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是来源于胃肠道间充质干细胞最常见的间叶源性肿瘤,在消化道肿瘤中约占1%~3%,其主要在胃及小肠中发生[1-2]。可发生于各年龄段,绝大多数病例发生于成年人,但在儿童中也有报道,且多为恶性,男女GIST发病率没有明显差异[3-4]。microRNA是一种广泛分布的内源性非编码蛋白质的小RNAs(约为22个核苷酸),其特点是可以结合到mRNA的3'UTR端来发挥其负调控基因表达的作用[5]。现已证实,miRNA与肿瘤的发生发展具有紧密的联系[6]。

研究显示,miRNA在胃肠道间质瘤中同样存在着差异表达,多种miRNA参与胃肠道间质瘤细胞的增殖、侵袭、凋亡等过程,表明miRNA在胃肠道间质瘤形成发展中扮演着重要角色[7-10]。miR-124也是被认可的miRNA家族中的成员之一,已有研究表明,miR-124在肿瘤性疾病、神经发生中表达有明显异常,扮演着重要的调控角色[11-15]。但目前有关miR-124在胃肠道间质瘤中的表达情况及调控作用研究相当少,其具体作用机制仍然是不清楚的。本研究中通过实时荧光定量PCR检测了miR-124在胃肠道间质瘤组织和细胞中的表达,并且进一步探讨了miR-124对于GIST-T1细胞增殖、侵袭、凋亡的影响以及相关的分子机制。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 主要试剂细胞培养基DMEM、胎牛血清、胰蛋白酶购自Sigma;Lipofectamine 2000转染试剂和Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒购自Invit‐rogen公司;逆转录试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒购自大连宝生物工程有限公司;双荧光素酶报告检测试剂盒购自Promega公司;Capn4-3'UTR和Capn4-3'UTR MUT由擎科生物有限公司设计;……

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