何玲 犹秋香 陈光梅 王启春 江显萍 吴立新 熊劲 贺歆彦

(1黔南州人民医院老年科，贵州 都匀 558000；2重庆医科大学附属第三医院神经疾病中心；3黔南州人民医院神经内科)

帕金森病(PD)是一种在老年人群中较为常见的神经系统疾病〔1〕。有调查研究显示我国65岁以上人群患有PD的概率为1.7%，虽然PD有遗传效应但绝大多数的疾病患者都是散发病例〔2〕。PD患病因脑中的脑黑质多巴胺能神经元出现变性死亡，从而导致黑质多巴胺的含量减少而患病〔3〕。但导致黑质多巴胺能神经元死亡的原因仍尚未清楚，目前主要影响因素包括机体老化、遗传因素、环境因素、氧化应激等〔4〕。雌二醇是一种甾体雌激素，雌激素对于中枢神经系统具有一定的保护作用，有研究显示老年人体患PD与其雌性激素分泌量的减少有着一定的关系，但是将雌激素用于临床治疗却有着较大的争议〔5〕。本文拟探讨雌二醇对PD病细胞损伤模型中PC12细胞Cav1.3基因的表达影响，为雌激素与PD之间的关系研究提供参考。

1 材料与方法

1.1材料 主要试剂：DMEM高糖培养基、6-羟多巴胺(6-OHDA)、17β-雌二醇、胎牛血清、马血清、磷酸盐缓冲液(PBS)、裂解液等。主要仪器：离心机、各类实验用玻璃仪器、电泳机等。

1.2PC12细胞的培养 用DMEM完全培养基培养PC12细胞株，其中DMEM完全培养基的组成为5%的胎牛血清、5%的马血清(灭活)、青霉素(100 U/ml)、链霉素(100 μg/ml)，传代接种时用2×105/ml的细胞密度悬液进行，接种在25 cm2细胞培养瓶中。细胞培养的环境设置为温度37℃、CO2浓度为5%、湿度为饱和湿度，每培养2～3 d进行1次换液，培养4～6 d后进行1次传代。……