蒋来 刘勇 杨立涛

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）发病率位居世界恶性肿瘤的第三位，其中美国、欧洲和东亚地区人群发病率较高[1]。对于局部晚期和转移性CRC患者，虽然采取多学科综合治疗，但仍有近1/3的患者死于肿瘤转移和疾病进展[2]。随着转移性肿瘤细胞的检测技术和平台的开发，肿瘤细胞液体活检技术逐步用于临床，以提高转移病灶的检出率和治疗成功率[3]。在液体活检计数中，作为主要成分的循环肿瘤细胞（circulating tumor cell，CTC）可携带外周血液循环中活肿瘤细胞的生物信息，有助于转移病灶的临床治疗。由于肿瘤患者外周血中CTC含量极低，临床上如何提高CTC的富集效率仍具有较高的技术挑战性[4-5]。上皮细胞黏附分子（epithelial cell adhesion molecule，EpCAM）、细胞角蛋白（cytokeratin，CK）广泛表达于多数上皮来源的恶性肿瘤，常作为富集CTC的主要标志物[6-7]。虽然肿瘤生物标志物在肿瘤细胞中具有较好的特异性，但由于富集过程中肿瘤细胞易丢失，导致CTC的富集效率较低。在CTC的阴性富集过程中，CD45+白细胞的去除是关键步骤，该步骤通过抗体结合和磁场分离电荷将白细胞从提取液中移除，留下带有肿瘤细胞的溶液[8]。根据笔者前期CTC富集结果和实验操作，发现部分CD45-的肿瘤细胞被磁场中白细胞团块包绕并锁定在试管壁上，同时与白细胞一起被移除，导致肿瘤细胞的富集效率低下。为提高富集效率，笔者在实验中将本该与白细胞一起移除的试管进行再次洗脱和磁场分选，从而将白细胞团块包绕的肿瘤细胞提取出来，以提高CTC的富集效率。……