邬仲鑫 蔡炜龙 尹磊

胆囊癌起源于胆道上皮细胞，是胆道系统最常见的恶性肿瘤[1-2]，在我国其发病率逐年增加。由于胆囊癌早期缺乏明显和特殊的临床症状，且易转移，因此大多数患者明确诊断时已处于肿瘤中晚期。目前，根治性切除是胆囊癌唯一有效的治疗方法，但其根治性（R0）切除率低[3]。胆囊癌对放化疗效果不显著，尚无有效的靶向治疗或免疫治疗方案，因此预后极差，患者平均生存时间只有5.2～24.4个月，且近年来，胆囊癌患者的5年相对生存率持续下降[4]。因此，目前亟待了解胆囊癌发生、发展的相关机制并研制出针对性较强的分子靶向治疗药物[5]。上皮细胞黏附分子（EpCAM）是一种分子量为40 kD的Ⅰ型跨膜糖蛋白，其通过参与细胞核信号传导、介导肿瘤细胞迁移、增殖和分化等过程，在肿瘤的发生和远处转移中发挥重要作用。大量研究表明，EpCAM在结肠癌、肺癌、胃癌等肿瘤中呈高表达[6]，且抗EpCAM靶向药物已用于治疗恶性腹腔积液[7]。然而有关EpCAM在胆囊癌中的作用研究很少，因此本研究探讨沉默EpCAM表达对胆囊癌细胞增殖和迁移的影响。

1 材料和方法

1.1 实验材料 人胆囊癌细胞株（EH-GB1、EH-GB2、GBC-SD、NOZ、OCUG-1、SGC-996）由中国科学院上海生命研究院细胞资源中心提供。DMEM培养基、William′s培养基、RPMI1640培养基、Opti-MEM培养基和FBS均购自美国Gibco公司；链霉素-青霉素双抗购自上海翊圣有限公司；小干扰RNA si-NC和si-EpCAM（5′-CUAC AAGCUGGCCGUAAACdTdT-3′）、EpCAM引物均由上海拓然生物科技有限公司合成；脂质体转染试剂LipofectamineTM2000购自美国Invitrogen公司；CCK-8试剂盒、多聚甲醛、结晶紫均购自上海碧云天生物科技有限公司。……