夏一鸣黄晓玲仝慧慧齐浩铭莫丽冬王 辰范维佳黄慧玲∗

(1.天津医科大学,天津 300070;2.天津市环湖医院,天津市神经外科研究所,天津市脑血管与神经变性重点实验室,天津 300350)

基因敲除技术是通过同源重组将靶基因的某些重要外显子或功能结构域、甚至所有外显子敲除掉,导致靶基因的表达失败。而条件性基因敲除技术可以对感兴趣的特异性组织或细胞中的细胞进行时空特异性的敲除,却不造成生物本身的死亡。自从1994年Gu等[1]第一次报道了利用噬菌体P1的Ⅰ型拓扑异构酶Cre重组酶条件性敲除DNA聚合酶β片段后,在新型基因打靶中,Cre-loxP重组系统获得广泛应用,成为条件性打靶技术、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略核心。随着CRISPR/Cas9技术的迅速崛起,使用CRISPR/Cas9技术和Cre-loxP技术条件性敲除小鼠或大鼠已成为基因敲除研究的新型方式。

牛磺酸(taurine,Tau)是一种内源性的含硫β-氨基酸,化学结构式为H2N-CH2-CH2-SO3H。Tau虽不参与蛋白质的合成,但是具有非常广泛的营养生理作用[2]。Tau能够改善低蛋白孕鼠甲状腺功能,可以促进大脑的发育[3-4]。在脑组织中,Tau含量水平非常高,高达40 mmol/L[5]。研究表明:长期缺乏Tau将导致脑萎缩、心力衰竭、视网膜病或免疫缺陷[6-7]。文献报道以及我们的前期研究显示:Tau对维持机体正常功能有广泛的生物学作用,对神经组织缺血、缺氧及缺血再灌注损伤具有明显的防治作用[8]。

Tau主要是通过细胞膜上高亲和性的牛磺酸转运体(taurine transporter;TauT;slc6a6)逆浓度梯度主动跨膜转运,以维持脑细胞内的Tau高浓度(胞内浓度约为细胞外的400倍),调节脑细胞渗透压[9]。……