田 凤，龙梦晖，宁志丰，佘同辉**

(1.湖北科技学院药学院，湖北 咸宁 437100；2.湖北科技学院基础医学院)

前列腺癌(prostatic cancer，PCa)是一种常见实体肿瘤，也是男性癌症相关发病率的主要原因[1]。目前，晚期前列腺癌仍然是最常见和致命的癌症之一，严重威胁着我国人民的生命健康。橄榄苦苷(oleuropein)是一种存在于橄榄科植物中的天然酚类化合物，无论单独还是联合使用，它在恶性肿瘤中均显示出重要的抗癌潜力[2]。因此，本研究以人前列腺癌细胞株PC-3为研究对象，通过体外细胞实验来探讨不同浓度的橄榄苦苷对人前列腺癌的抑制作用，以期为橄榄苦苷在临床上的应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 药物与试剂

橄榄苦苷购自SIGMA公司，先用DMSO配成10mmol/L的橄榄苦苷原液，然后按实验要求用RPMI-1640培养基稀释成0、20、40、80、160、320μmol/L；Bad、Bcl-2购自中国碧云天生物公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养

人前列腺癌细胞株PC-3购自中国典藏物培养中心，液氮保存。将PC-3细胞培养在含10%胎牛血清、1%青链霉素的RPMI-1640培养基中，取对数生长期细胞状态良好的细胞进行实验，所有实验重复6次。

1.2.2 细胞增殖

采用MTT实验。调整培养的PC-3细胞密度为1.0×106/mL，以5000个/孔细胞接种于96孔板，于给药后24h加MTT溶液，并用酶标仪于490 nm处测出每孔的吸光度(A)值。

1.2.3 细胞迁移

采用划痕实验。取对数生长期的PC-3细胞，以1.0×105个/孔接种于6孔板，过夜培养后划痕，PBS润洗，加入2mL含药物的无血清培养基，于培养0、24h后拍取相应时间点的照片。

1.2.4 细胞侵袭

采用Transwell实验。上室铺Matrigel胶待其凝固后，PC-3细胞以1.0×105个/孔接种于上室，下室加含药物的培养液，培养24h后，用棉签轻轻擦去未穿膜的细胞，0.1%结晶紫染色后，显微镜下拍照并计数。……