马聪

【摘要】目的：探讨羊水细胞荧光原位杂交技术与核型检测结果的分析。方法：选取2019年6月至2020年6月，运用荧光原位杂交技术检测的120例19-29周孕妇的未培养羊水细胞，并对其进行核型检测结果分析。结果：120例未培养羊水细胞运用荧光原位杂交技术检测成功119例，其中检出正常106例，数目异常13例，与常规细胞培养核型分析结果一样。此外3例正常变异，1例嵌合体，还有1例21三体没有被该项技术检测出来。结论：运用荧光原位杂交技术检测未培养羊水细胞染色体数目异常，不仅操作简单快读，而且所运用的样本数量也较少，其能有效补充羊水细胞染色体核型分析。因此荧光原位杂交技术联合羊水细胞培养，能够好地服务于产前诊断。

【关键词】羊水细胞;荧光原位杂交技术;核型检测;结果

【中图分类号】R714.15 【文献标识码】A 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2021.03.251

出生缺陷对人类的健康造成了非常严重的威胁，同时也为社会及患者的家庭到来了极大的经济负担。因为遗传原因致使出生缺陷占七成左右，而最为常见的遗传因素就是染色体畸形[1]。因为染色体疾病没有办法治疗，因此产前诊断染色体疾病，對于防止出生缺陷至关重要。经过产前的有效筛查和诊断，降低该类新生儿出生的概率，能有效为社会及患儿家庭减轻一定的负担[2]。基于此，本院此次研究分析了羊水细胞荧光原位杂交技术与核型检测结果，详细报告如下。

1 资料与方法

1.1临床资料

本研究以2019年6月至2020年6月的120例人员将其作为研究对象。患者最小年龄为19岁，最大年龄为39岁，平均年龄为（28.89±9.12）岁。孕周为19-29周。对所有患者同时做羊水细胞培养及荧光原位杂交技术。产前诊断指征包括：（1）孕中期母血清筛查高风险50例;（2）孕妇年龄高于35岁的患者25例;（3）不良孕产史6例;（4）超声产前筛查4例，其中有1例胎儿脖颈后透明带变厚;（5）孕妇外周血无创胎儿DNA检测存在高风险的患儿2例;（6）其他原因导致10例。患者全部已签署了产前诊断知情同意书。

1.2方法

1.2.1常规羊水细胞培养，在B超的指引下，将淡黄色的清亮羊水抽取25毫升，将其分为两份，运用荧光原位杂交技术检测的患者使用5毫升，运用常规细胞染色体核型分析的患者使用20毫升，在培养8-10天以后添加秋水仙素，在5小时以后收获，并制片，G显带以后，对其进行染色体核型分析，计数为30个细胞，对5个核型进行分析。

1.2.2荧光原位杂交技术检测未培养羊水细胞染色体非整倍体，运用国产的该技术探针。未培养羊水细胞对照公司提供的操作步骤处理之后进行荧光原位杂交技术分析。对每组探针进行有效观察，随机技术不能少于50个细胞。整倍体样本荧光原位杂交技术检测结果应有大于90%的间期核计数为整倍体;不是整倍体样本荧光原位杂交技术检测必须不能少于60%的间期合计数;如果计数结果接近10%，不能将嵌合体情况排除，所以必须添加计数到200个细胞核。

2 结果

2.1荧光原位杂交技术的检测结果

120例羊水细胞成功股119例，有1例因为细胞太少没有办法进行判读。

2.2对比羊水培养染色体核型分析及荧光原位杂交技术结果

羊水培养一次成功119例，成功率高达99.17%。1例经唐氏筛查21三体高风险标本，因孕期大于23周，导致羊水培养失败，之后进行了无创产前基因检测，结果呈低风险状态，荧光原位杂交技术检测结果正常。

培养成功的检测出正常核型为101例，21三体9例，18三体2例，47，XXX1例，47XXY1例，45，X1例。还有1例21三体运用荧光原位杂交技术没有检测出来，但羊水培养发现其核型为46，XN，rob（21;21）（q10;q10）。有1例染色体嵌合体核型，并不在荧光原位杂交技术的检测范围里，经B超检查之后最终停止妊娠。

3 讨论

综上所述，当前已经有很多技术在产前诊断中被运用，但是都有一定的局限性，并且价格昂贵，同时也没有办法确定多少基因拷贝数的变异能致使胎儿异常。但自从荧光原位杂交技术检测出未培养羊水间期细胞染色体数目异常开始，该技术已经逐渐成为产前诊断的主要方法[3]。其主要运用荧光标记探针对21三体、18三体、13三体及性染色体非整倍体等常见染色体畸形进行快速检测。其不仅技术诊断快速，而且具有较高的成功率，是传统核型分析非常重要的一个补充。

在以往羊水细胞培养的模型分析中，最少要有20毫升羊水才能有效进行双培养体系[4]。此外，羊水细胞培养核型分析能不能成功与细胞培养过程中，克隆细胞、收获细胞及分裂细胞等多少有非常直接的联系，并且操作步骤较多，非常有可能导致失败，而且等报告的时间也相对较长，一般要3周左右。而荧光原位杂交技术检测，相对常规检测而言，不仅需要的羊水样本量少[5]，而且不需要对羊水细胞进行培养，杂交信号简单直观，计数相对也比较容易，报告也能快速出来。一般48小时以内就能出报告，操作步骤简单，极易辨别结果。

但是荧光原位杂交技术在染色体数目及性染色异常的诊断过程中，可取代部分，但不能完全取代以往的染色体核型分析。伴随着产前筛查及诊断的不断发展，提供了更多的检测技术。而荧光原位杂交技术已然成为非常重要的产前诊断方式之一，可与多种检测手段相结合，进而有效提升产前诊断的准确率及效率，并更高效地满足临床需要。

参考文献：

[1]周静，周冉，王玉国，等.不同检测方法在羊水细胞性染色体嵌合产前诊断中的应用比较[J].现代妇产科进展，2021，30（2）：92-95.

[2]郭芬芬，杨红，徐盈，等.324例性染色体非整倍体产前诊断分析及遗传咨询[J].现代妇产科进展，2021，30（2）：137-140.

[3]李显筝，许玲，胡晶晶，等.荧光原位杂交技术在产前诊断染色体嵌合体中的应用价值[J].国际生殖健康/计划生育杂志，2020，39（2）：104-108.

[4]侯东霞，侯丽青，董弘，等.联合应用染色体核型分析、微阵列分析和荧光原位杂交技术诊断Pallister-Killian综合征胎儿一例[J].中华医学遗传学杂志，2020，37（11）：1276-1279.

[5]李一平，任华.细菌人工染色体微球技术对微缺失/微重复综合征的产前诊断[J].海南医学，2020，31（2）：221-223.