薛婷月，廉乐乐，李婉君，薛 峰

（南京农业大学动物健康与食品安全国际合作联合实验室，江苏南京 210095）

副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）为革兰氏阴性菌，其感染途径主要是食入生或未烹饪完全的海产品[1]。III型分泌系统（type III secretion system，T3SS）是高度组织化的多蛋白纳米机器[2-4]，包括结构蛋白、分泌蛋白以及伴侣蛋白等，在多种革兰氏阴性菌致病过程中扮演重要角色。研究发现，多数副溶血弧菌临床分离株含有两套T3SS[5]，包括位于1 号染色体的T3SS1 和位于2 号染色体的T3SS2，其分别表现细胞毒性与肠毒性[6]。T3SS1 是副溶血弧菌的重要毒力因子，但其致病机制尚未被阐明。

T3SS 要将具有毒性作用的效应蛋白输送到细胞内起作用，最关键的一步就是要先分泌并组装成具有运输功能的分泌器装置，且只有与分泌器顶端的两个疏水性转位蛋白结合才能激活输送作用[7]，而针状蛋白在其中扮演着很重要的角色[8-9]。有关学者研究发现，在大多数革兰氏阴性细菌中，菌体可将自身分泌的6 kD 左右的单体针蛋白聚合成细胞外针状组分，从而协助菌体穿透真核质膜而形成效应子易位的分泌管道[10-12]。

vscF基因编码的VscF蛋白是T3SS1 的针状蛋白。本研究利用生物学软件分析预测针状蛋白VscF 线性抗原表位并选择最优多肽序列送至公司合成，然后与具有高度免疫原性的KLH蛋白偶联，制备针对VscF蛋白的特异性多克隆抗体，旨在缩短常规抗原蛋白表达纯化所需时间，获得VscF 特异性多克隆抗体，为后续VscF 相关蛋白互作研究提供必要的抗体基础。……