王树艳，沈前程，陈智武，凌 丁，粟永春

（1.广西农业职业技术学院，广西南宁 530007；2.广西金陵农牧集团有限公司，广西南宁 530049）

禽白血病（avian leukosis）是由反录病毒科、禽C型反录病毒群禽白血病病毒（avian leukosis virus，ALV）引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称，是一种重要的免疫抑制性疫病，可造成感染鸡群免疫抑制、抵抗力降低、生产性能下降等多种危害[1]。ALV 具有垂直传播特性，感染鸡群随着繁育有感染加剧情况[2]。近年来，鸡群ALV 感染和临床暴发次数增加，混合感染严重[3]。

目前防控该病没有有效的疫苗和药物。实施种禽ALV 净化是控制该病的最根本方法。改进ALV 分离过程和提高检出率，能够加快ALV 净化进展，降低企业净化投入，对ALV 净化起到积极的推动作用。ALV 检测的常规法是通过离心分离血浆，然后接种于DF-1细胞来检测的方法，是分离、检测ALV 最准确、最标准的方法[4-5]，而改进法则是通过自然沉淀分离血浆来检测。本试验对比了离心分离和自然沉淀血浆两种方法对DF-1 细胞以及ALV 检出率的影响，以期为提高ALV 检出率提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验动物及分组

随机选择94 只225 日龄某公司淘汰公鸡，每只采集2.0 mL 血液，分别注入2 支肝素钠抗凝管（1.0 mL/管）中，分A、B 两组，颠倒混匀，分别标识（A1—A94、B1—B94）。其中A 组（改进法）抗凝血在室温自然沉淀2 h，B 组（常规法）常规离心，待抗凝血分层后，2～8 ℃冷藏备用。

1.2 主要试剂及仪器

DMEM高糖培养基（批号8120281），GIBCO 公司产品；胎牛血清（批号20050504），浙江天杭生物科技股份有限公司产品；DF-1 细胞，哈尔滨兽医研究所馈赠；DMSO（批号1029B031），北京索莱宝科技有限公司产品；……