李凯航，刘 健，杨显超，赵 鹏，卫龙兴，李 鑫，杨德全，陶田谷晟，周锦萍

（1.上海市动物疫病预防控制中心，上海 201103；2.山东农业大学，山东泰安 271018；3.奉贤区动物疫病预防控制中心，上海 201400）

近年来，随着对禽白血病（avian leukemia，AL）防控净化的日益重视，针对禽白血病病毒（avian leukemia virus，ALV）检测方法的相关报道[1-2]较多。目前，国际上ALV 净化检测的普遍方法是使用胎粪和蛋清作为主要检测样品，开展ALV p27抗原ELISA 检测。该方法准确、可靠，应用广泛，但存在一定技术难度。因此，个别种鸡场使用泄殖腔棉拭子作为主要净化检测样品。近年流行病学研究[3-5]发现，我国很多地方品种鸡泄殖腔棉拭子AIV p27 抗原ELISA 检测阳性率可达6%～90%，但受检鸡只不表现任何临床病变。另外，在种鸡场ALV 净化检测中，血浆病毒分离作为净化检测的主要方法之一，数据准确且可靠性高，而精液和蛋清的ALV 检出率与血浆存在一定差异。针对净化实施中这些实际问题，笔者所在实验室开展了种鸡群ALV 净化检测中多种样品的比对，以期通过比较，为ALV 净化检测中的样品选用提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂、仪器及试验动物

ALV p27 抗原ELISA 检测试剂盒（货号99-09257），购自北京爱德士元亨生物科技有限公司；DMEM 细胞培养液、胎牛血清（FBS）、胰酶消化液（0.25%）、青链霉素溶液（100×），购自GIBCO 公司；两性霉素B，购自北京索莱宝科技有限公司；肝素钠抗凝管，购自和瑞医疗器械有限公司；其他试剂均为国产分析纯。TECAN SUNRISE 酶标仪，为瑞士TECAN 公司产品；CO2细胞培养箱，为美国Thermo 公司产品；DF-1 细胞，由山东农业大学动物科技学院禽病研究室赠送；……