王岩航，叶效明#，姚 璐，孙成宏，姚景春，屠鹏飞，张贵民*，曾克武*

淫羊藿苷元治疗血小板减少症的靶点鉴定及作用机制研究

王岩航1，叶效明1#，姚 璐1，孙成宏2，姚景春2，屠鹏飞1，张贵民2*，曾克武1*

1. 北京大学 天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京 100191 2. 鲁南制药集团股份有限公司 中药制药共性技术国家重点实验室，山东 临沂 276006

探索淫羊藿苷元治疗血小板减少症的直接作用靶点及作用机制。从BALB/c小鼠股骨中分离得到原代骨髓细胞，利用键合淫羊藿苷元的琼脂糖微球捕获并鉴定靶点蛋白，使用表面等离子共振（surface plasmon resonance，SPR）技术进行靶点确证；采用Western blotting检测淫羊藿苷元对胰岛素受体底物1（insulin receptor substrate 1，IRS1）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）/糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β，GSK3β）、Hippo、细胞周期、Janus激酶（Janus kinase，JAK）/信号转导与转录激活子（signal transducer and activator of transcription，STAT）和核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）通路相关蛋白的调控作用；通过流式细胞术检测淫羊藿苷元对巨核细胞系分化的影响。共发现20个与造血干细胞增殖分化功能密切相关的靶点蛋白，且淫羊藿苷元可能通过作用于泛素羧基末端酯酶L5（ubiquitin carboxyl-terminal esterase L5，UCHL5）、肿瘤坏死因子α诱导蛋白8（tumor necrosis factor α-induced protein 8，TNFAIP8）、Visfatin靶点，进而激活IRS1/Akt/mTOR/GSK3β和细胞周期通路，并抑制Hippo、JAK/STAT和NF-κB通路，最终促进巨核细胞的分化。淫羊藿苷元通过UCHL5、TNFAIP8、Visfatin等多靶点治疗血小板减少症。

血小板减少症；淫羊藿苷元；靶点识别；信号通路；巨核细胞

血小板减少症是指由于血小板的数量大量减少，造成凝血功能障碍，并以自发性出血为特征的临床常见疾病[1]。血小板减少症的发病机制较为复杂，一方面是血小板的自身生成不足，另一方面是免疫失调导致的血小板破坏过多所致[2]。……