钱雪梅

（南京外国语学校 江苏南京 210008）

现代社会中，生物学科学发展迅猛，基因工程技术也是日新月异。基于基因工程这部分内容在高中教材中的呈现、高考要求，下面对几个高频出现的问题做了整理和简要阐述。

（1）自然界中的农杆菌侵染植物细胞时，只将其内部Ti质粒中的一段T-DNA侵入并整合到植物细胞中的染色体上，其自身并不侵入植物细胞中，有什么意义？

农杆菌侵染的主要是双子叶植物和裸子植物，当植物体细胞受损伤时，损伤的部位分泌出酚类物质，如乙酰丁香酮、羟基乙酰丁香酮等物质。这些酚类物质可诱导农杆菌中的Ti质粒中的Vir基因的表达，且表达的一部分产物参与将Ti质粒上T-DNA片段的一条链切下，另一部分产物即与该单链T-DNA形成复合物，保证复合物的稳定性，同时促进其侵入植物细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上。当其T-DNA成功插入植物细胞的染色体组后，其在植物细胞中表达并产生大量的生长素、细胞分裂素及冠瘿碱等物质。激素类物质可促进受伤部位的细胞大量增殖形成冠瘿瘤，冠瘿碱从瘤细胞中分泌出去作为农杆菌的碳源和氮源，同时冠瘿碱有利于农杆菌吸附于植物细胞壁上，更有利于其得到更多的有机物，从而更好地进行繁殖。

（2）构建基因表达载体时，在目的基因前后加装的启动子和终止子是如何选择的?

启动子和终止子是基因表达时RNA聚合酶的识别位点。在体外构建基因表达载体时，启动子和终止子通常是已经安装在载体上，只需将目的基因的片段插入到载体中特定的启动子和终止子之间即可。……