戴银 胡晓苗 赵瑞宏 张丹俊 潘孝成 沈学怀 尹磊 周学利 侯宏艳

摘要 [目的]为快速地鉴别鹅细小病毒（GPV）、番鸭细小病毒（MDPV）和禽腺病毒血清4型（FAdV-4）3种病毒，建立一种特异强、敏感高、重复性好的三重PCR检测方法。[方法]根据Genbank登录的MDPV、GPV和FAdV-4的基因序列，设计3对特异性引物，以提取的核酸为模板，进行PCR特异性、敏感性和重复性试验。[结果]采用所建立的方法能够扩增出GPV、MDPV和 FAdV-4 特异性片段，且不能检出鸭黄病毒（DFV）、鸭 I 型肝炎病毒（DVH-Ⅰ）和禽呼肠孤病毒（ARV）;GPV、MDPV 和 FAdV-4 核酸模板的最低检测量分别为20、2、2 pg;对8份阳性临床病料进行检测，可见MDPV、GPV和FAdV-4的检出率均为100%。[结论]建立的三重PCR检测方法能够对MDPV、GPV和FAdV-4这3种病毒进行快速、准确的诊断。

关键词 鹅细小病毒（GPV）;番鸭细小病毒（MDPV）;禽腺病毒4型（FAdV-4）;三重PCR检测

中图分类号 S 855  文献标识码 A  文章编号 0517-6611（2021）15-0183-02

Abstract [Objective]In order to quickly identify three kinds of goose parvovirus （GPV）， muscovy duck parvovlrus （MDPV） and fowl adenovirus serotype 4 （FAdV4）， to establish a triple virus with strong specificity， high sensitivity and good repeatability PCR detection method.[Method]According to the gene sequences of MDPV， GPV and FAdV4 registered in Genbank， 3 pairs of specific primers were designed and the extracted nucleic acid was used as a template to perform PCR specificity， sensitivity and repeatability tests.[Result]The established method could amplify specific fragments of GPV， MDPV and FAdV4， and cannot detect duck flavivirus （DFV）， duck viral hepatitis typeⅠ（DVHⅠ） and avian reovirus （ARV）.The minimum detection levels of GPV， MDPV and FAdV4 nucleic acid templates were 20， 2 and 2 pg， respectively.The detection of 8 positive clinical materials showed that the detection rates of MDPV， GPV and FAdV4 were all 100%.[Conclusion] The established triple PCR detection method can quickly and accurately diagnose the three viruses MDPV， GPV and FAdV4.

Key words Goose parvovirus （GPV）;Muscovy duck parvovlrus （MDPV）;Fowl adenovirus serotype 4 （FAdV4）;Triplex PCR detection

基金项目 安徽省科技重大专项（202003a06020012）;安徽省畜禽疫病研究中心项目（2020YL094）;安徽省家禽产业技术体系（AHCYJSTX-06）。

作者简介 戴银（1980—），女，安徽蒙城人，副研究员，博士，从事兽医微生物与免疫学研究。*通信作者，研究员，从事畜禽传染病学研究。

收稿日期 2020-10-10;修回日期 2021-01-28

番鸭细小病毒（muscovy duck parvovlrus，MDPV）和鹅细小病毒（goose parvovirus，GPV）都是细小病毒科、细小病毒亚科、依赖病毒属成员[1]。MDPV可引起雏番鸭的细小病毒病，又称番鸭3周病，该病具有高度的传染性，主要导致雏番鸭消化道、肠道等部位的病变，发病率和死亡率较高[2-3]。GPV又称小鹅瘟，是一种急性或亚急性败血性传染病，传播速度快[4];该病以肠道的病变为主要特征，主要侵害20日龄以下雏鹅，也可感染雏番鸭，发病率、死亡率可高达100%[5]。……