李冰晶，罗丽平，赵景芳，王代波，刘国华，文光琴

(1贵州省生物研究所，贵州 贵阳 550009；2贵州省植物园，贵州 贵阳 550009)

蓝莓(Vacciniumuliginosum)，又称越桔或蓝浆果，属杜鹃花科越桔属落叶灌木植物，蓝莓中含有非常丰富的营养成分，被誉为“浆果之王”[1]，果实中含有丰富的维生素、膳食纤维、蛋白质和矿物质等营养元素，其中蓝莓中花青素含量较高。蓝莓果实中含有的活性物质具有抗衰老、缓解视疲劳、改善记忆力、抗氧化、抗癌症等功效[2]。

蓝莓中含有多种活性物质，花青素为其中含量较高的一种[3]。为了更好地研究蓝莓粗提物中成分，利用高效液相色谱(HPLC)对蓝莓提取物进行分析[4-10]，通过单因素分析法，考察流动相组成、流速、柱温、进样量和时间梯度等对蓝莓粗提物分离的影响，从而确定出HPLC测定蓝莓粗提物的最佳条件。

1 实验材料

1.1 实验原料与试剂

蓝莓，由麻江羊盖蓝莓基地提供；乙醇(食品级)；乙腈(色谱纯)；甲醇(色谱纯)；磷酸(分析纯)；乙酸(分析纯)；蒸馏水；AB-8型大孔树脂，购于上海蓝季。

1.2 实验仪器

Agilent1260高效液相色谱；BUCHI R114旋转蒸发仪；DZF-6021真空干燥箱；722S型可见光分光光度计；GTR16-2型离心机；DKS-28型电热恒温水浴锅；电子天平A2004；PHSJ-4A型PH计；DW-4OL262型医用低温保存箱；BCD-206SM型海尔冰箱。

2 实验方法

2.1 样品制备

将新鲜蓝莓称重置于烧瓶中，加入75 %的乙醇密封避光浸泡15 d。过滤，浓缩提取液，用大孔树脂对浓缩液进行初步分离，得到水洗脱的蒸馏水流份和乙醇洗脱的蓝莓提取物流份，浓缩蓝莓提取物流份，得到蓝莓粗提物。

2.2 HPLC色谱条件考察

影响高效液……