孙晶莹 封 青 李 研 霍雪萍 孙丽君

陕西省人民医院中心实验室，陕西西安，710068

白癜风是皮肤黑素脱失后白斑为主要表现的皮肤性疾病，目前该疾病发病机制尚不明确，但该疾病和人体自身免疫力及遗传因素有一定关系[1,2]。导致白癜风的主要原因是人体黑素细胞遭到破坏，细胞中黑素颗粒不断减少，进而引起皮肤斑片状色素脱失。近年来的研究表明，窄谱中波紫外线(narrow bound ultraviolet B light, NB-UVB)在临床上治疗白癜风具有较好疗效，其可促进黑素细胞黑素的合成和增加酪氨酸酶活性，从而有效缓解白癜风症状[3-5]，但其具体机制仍不清楚。

本研究使用上海西格玛公司生产的SS型紫外线光疗仪，波长为311～313 nm，该波段的紫外线光毒性小，色素恢复较一致，色差小，疗效好。用此光疗仪作用黑素细胞，研究不同剂量的紫外线照射对黑素细胞的细胞活性、黑素含量以及黑素合成相关基因表达的影响，探讨NB-UVB对黑素合成的影响及在白癜风复色中的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验材料 人来源的传代稳定的黑素细胞系PIG1，由芝加哥洛约拉大学Caroline Le Poole教授惠赠。黑素细胞基础培养基Medium 254及培养基添加剂HMGS-2 均购自Gibco公司; 胎牛血清购于Hyclone 公司; RNA 提取试剂盒购自AG公司;反转录试剂盒 PrimeScript RT reagent kit、荧光PCR酶SYBR Premix Ex TaqTM Ⅱ kit均购自TaKaRa公司，引物由上海生工合成; Tyr、Tyrp2、GPNMB、MART-1抗体均购于Abcam公司，Syntenin抗体购自proteintech，β-actin、HRP羊抗鼠、HRP羊抗兔购于康为试剂，NC膜购自Pall Corporation公司。

1.1.2 实验仪器 CO2培养箱购于Heraeus公司; 核酸测定仪Nanodrop2000c和冷冻高速离心机均购于Thermo Scientific公司;倒置荧光显微镜购于Olympus公司;荧光PCR仪7500 购于ABI公司;电泳仪和转膜仪购于BIO-RAD，凝胶成像分析系统购自美国Alpha Innotech，紫外光疗仪SS-03B型光疗仪(上海希格玛高技术有限公司，波长311 nm)。……