系统性红斑狼疮病人血清人附睾分泌蛋白4和抗双链DNA抗体水平与病情活动性的相关性
2021-09-02马玲余静
马玲，余静
作者单位：德阳市人民医院风湿免疫科，四川德阳618000
系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种累及机体多系统的自身免疫性疾病，临床常伴随产生大量自身抗体。目前，SLE发病原因尚未完全阐明，临床上多认为与感染、内分泌、免疫异常等因素有关，虽然上述因素对评估SLE疾病活动度具有重要作用，但仍有部分SLE病人无法正确判断其疾病活动程度。因此，应继续探讨与SLE病人发病相关因子，以提高判断SLE病人疾病活动度准确性。人附睾蛋白4（Human epididymis protein 4，HE4）是一种蛋白酶抑制剂，其功能与自然免疫性有关。而抗双链DNA抗体（anti-dsDNA，抗dsDNA抗体）是SLE临床检测常用的血清标志物，与SLE疾病活动性密切相关。鉴于此，本研究通过检测SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗体水平等临床指标，分析SLE病人血清HE4和抗dsDNA抗体水平与疾病活动性关系，并探讨血清HE4、抗dsDNA抗体水平区分SLE病人非活动期及活动期的价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2017年1月至2018年12月在德阳市人民医院风湿免疫科进行诊治的74例SLE病人作为受试对象，其中女性68例，男性6例；年龄（32.98±10.75）岁，范围为20～45岁。本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》相关要求。入选标准：①均符合1997年美国风湿病学会对SLE修订的分类标准；②临床资料完整；③均为初次发病；④均自愿签署知情同意书。排除标准：①伴有其他自身免疫性疾病者；②女性妊娠或哺乳期；③近3个月内未服用过糖皮质激素类药物；④严重感染者。按照SLE病情活动指数（SLE disease activity index，SLEDAI）评分将74例SLE病人分为非活动期组35例（SLEDAI＜10分）和活动期组39例（SLEDAI≥10分）。非活动期组有女性32例、男性3例，年龄（32.01±10.46）岁，范围为20～44岁；活动期组有女性36例、男性3例，年龄（33.12±10.67）岁，范围为20～45岁。另选取同期在该院进行体检的57例健康者作为对照组，其中女性52例，男性5例；年龄（33.57±11.24
）岁，范围为20～46岁。上述三组受试者性别、年龄比较，均差异无统计学意义（P
＞0.05）。1.2 方法
1.2.1
血清标本采集所有受试者均于入院第2天清晨空腹抽血（静脉血），每人3 mL，3 000 r/min离心10 min，分离血清后保存于-80℃超低温冰箱备用。1.2.2
血清HE4、抗dsDNA抗体水平检测采用酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）双抗体夹心法检测血清HE4、抗dsDNA抗体水平，HE4试剂盒购自上海心语生物科技有限公司，抗dsDNA抗体试剂盒购自北京华夏远洋科技有限公司，具体步骤按试剂盒说明书进行。血清抗dsDNA抗体起始稀释倍数为1∶10，本研究以＜1∶10作为阴性（n
=32），≥1∶10作为阳性（n
=42）。1.2.3
其他临床指标检测采用免疫散射比浊法检测补体（C、C）、免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）水平，试剂盒均购自德国西门子公司；采用间接免疫荧光法检测抗核抗体（antinuclear antibody，ANA），试剂盒由欧蒙医学诊断（中国）有限公司提供，其起始稀释倍数为1∶100，本研究中低滴度为1∶10≤血清ANA≤1∶1 000，高滴度为血清ANA＞1∶1 000；采用比色法检测24 h尿蛋白定量。
2 结果
2.1 对照组与SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗体水平比较
SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗体水平分别为（83.44±26.53）pmol/L、（1.53±0.49）μg/L，均显著高于对照组的（39.16±8.25）pmol/L、（0.42±0.13）μg/L（t
=12.147、16.644，均P
＜0.001）。2.2 SLE病人血清HE4水平与抗dsDNA抗体关系
SLE病人抗dsDNA抗体阳性血清HE4水平为（99.34±30.69）pmol/L，明显高于抗dsDNA抗体阴性者的（58.16±17.52）pmol/L（t
=6.788，P
＜0.001），且SLE病人血清HE4与抗dsDNA抗体水平呈正相关（r
=0.698，P
＜0.001）。2.3 SLE病人血清HE4水平与病情活动性关系
SLE活动期病人SLEDAI评分、血清HE4水平分别为（14.95±4.07）分、（95.76±29.55）pmol/L，均明显高于非活动期的（6.52±2.13）分、（60.34±18.12）pmol/L（t
=10.974、6.130，均P
＜0.001），且SLE病人血清HE4水平与SLEDAI评分呈正相关（r
=0.587，P
＜0.001）。2.4 SLE病人血清HE4水平与其他临床指标相关性
SLE病人血清HE4水平与补体（C、C）水平呈负相关（P
＜0.05），与IgA、IgG、IgM、ANA滴度及24 h尿蛋白定量均呈正相关（P
＜0.05）。见表1。
表1 SLE病人血清HE4水平与其他临床指标相关性
2.5 ROC曲线分析血清HE4、抗dsDNA抗体水平区分非活动期及活动期SLE病人价值
血清HE4水平区分非活动期及活动期SLE病人的曲线下面积为0.912（95%CI
：0.848～0.977，P
＜0.001），最佳截断值为80.15 pmol/L，灵敏度为85.00%，特异度为90.00%；血清抗dsDNA抗体水平区分非活动期及活动期SLE病人的曲线下面积为0.904（95%CI
：0.836～0.973，P
＜0.001），最佳截断值为1.39 μg/L，灵敏度为75.00%，特异度高达97.50%。见图1。
图1 血清人附睾蛋白4（HE4）、抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）水平区分非活动期及活动期系统性红斑狼疮病人的ROC曲线
3 讨论
SLE是一种免疫介导引起机体多组织器官损伤的慢性炎症性疾病，多发于青年女性。SLE发病原因涉及环境、遗传和免疫紊乱等多个环节，在多种因素相互作用下可使机体产生许多自身抗体，同时在补体参与下可破坏细胞、组织，从而导致机体多脏器损伤。目前，SLE常用临床检测指标包括ANA滴度、补体C、C等，监测其水平变化对评估SLE疾病活动性具有一定帮助，但在区分SLE活动期与非活动期上效果不显著。因此，本研究通过分析SLE病人血清HE4和抗dsDNA抗体水平与疾病活动性关系，并采用ROC曲线评估其在区分SLE是否在活动期的价值，以期为SLE临床治疗提供帮助。
HE4首次发现于人附睾上皮细胞中，位于人染色体20q12～13.1，其编码产物蛋白质与精子成熟有关。HE4为乳清酸蛋白（WAP）基因编码产物，可通过4-二硫化物核心结构域发挥作用，因此又称WAP-4-二硫化物核心结构域2（WFDC2）。研究发现HE4可编码胰蛋白酶抑制物，在抵抗微生物毒力因子上发挥重要作用，还参与多种疾病的免疫防御功能，可能发挥免疫调节作用。因此探讨血清HE4水平对SLE病人具有重要意义。杨晓霞等研究报道，慢性肾脏病病人血清HE4水平远高于正常对照组，血清HE4水平与病人临床分期、肾间质纤维化比例等有关，且可作为评估慢性肾脏病病人预后的血清标志物。孟骞等研究发现，与对照组比较，子宫内膜异位症病人血清HE4水平显著升高，血清HE4可作为子宫内膜异位症的诊断依据。安黎云等研究报道，慢性肾脏病各期病人血清HE4水平与对照组比较均明显升高，且ROC曲线分析发现血清HE4水平对慢性肾脏病诊断价值较高。而抗dsDNA抗体是SLE病人体内重要的特异性抗体，其在SLE发生、发展中扮演着重要角色；且有研究发现，抗dsDNA抗体阳性可在一定程度上提示SLE处于活动期，因此研究血清HE4水平与抗dsDNA抗体关系具有一定临床意义。已有研究报道，抗dsDNA抗体参与狼疮肾炎发生、发展，并与SLE病人疾病活动性有关。
本研究检测结果发现，与对照组相比，SLE病人血清HE4、抗dsDNA抗体水平均显著升高，与杨晓霞等、孟骞等研究报道类似，提示血清HE4、抗dsDNA抗体水平可能参与SLE发病过程。为探讨血清HE4水平与抗dsDNA抗体及病情活动性关系，本研究发现SLE病人抗dsDNA抗体阳性血清HE4水平远高于抗dsDNA抗体阴性者，SLE活动期病人SLEDAI评分、血清HE4水平均远高于非活动期病人，且相关性分析发现SLE病人血清HE4水平与抗dsDNA抗体水平及SLEDAI评分均呈正相关，提示血清HE4水平与抗dsDNA抗体密切相关，并可在一定程度上反映SLE病人的疾病活动性。本研究还发现，SLE病人血清HE4水平与补体（C、C）水平呈负相关，与IgA、IgG、IgM、ANA滴度及24 h尿蛋白定量均呈正相关，进一步提示血清HE4水平与SLE活动程度有关。此外，本研究通过ROC曲线发现，血清HE4水平、抗dsDNA抗体水平均可有效区分非活动期及活动期SLE病人，且血清HE4水平效能优于血清抗dsDNA抗体水平，与安黎云等研究结果相似，提示血清HE4水平更有利于检测SLE病人疾病活动程度，从而为临床治疗提供一定帮助。
综上所述，血清HE4、抗dsDNA抗体水平在SLE病人中明显升高，二者水平变化与SLE病人疾病活动性有关，可作为区分活动期及非活动期SLE病人的有效指标，尤其是血清HE4水平。本研究仅初步探讨血清HE4水平与SLE病人疾病活动性关系，接下来应进一步研究证实。
