叶茂斌 肖明跃 陈妍林 熊维 经屏

(华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院神经内科，湖北 武汉 430000)

帕金森病(PD)是一种以运动功能障碍为特征的进行性神经系统疾病，现已成为第二常见的慢性和全身性神经退行性疾病，仅次于阿尔茨海默病(AD)〔1〕。据估计，每年每1 010 000人中将出现约8～18例新诊断的PD病例〔2〕。PD的特征是黑质致密部(SNpc)中多巴胺能(DA)神经元的特异性丢失及伴随着广泛的细胞内α-突触核蛋白(syn)聚集体，进而触发异常的神经信号，导致运动协调障碍和认知缺陷〔3〕。目前治疗PD的方法主要是缓解症状，而不是抑制PD的发展。近年来，非编码RNA(ncRNA)，特别是长链非编码RNA(LncRNA)和微小RNA(miRNA)在脑发育和分化等细胞过程及PD和AD等疾病中发挥着重要的调节作用〔4〕。LncRNA是一类长度超过200个核苷酸且无蛋白质编码能力的ncRNA〔5〕。研究表明，LncRNAs在大脑中经常被上调，并参与许多神经生物学功能和神经退行性疾病〔6〕，其中母细胞表达基因(MEG)3可通过靶向miR-147增强PC12细胞缺氧损伤〔7〕，β淀粉样肽1～42可通过促进MEG3表达诱导SH-SY5Y细胞凋亡〔8〕。然而，MEG3在PD中的确切作用仍不清楚。本研究将探究LncRNA MEG3在MPP+诱导的PD细胞模型中的表达及其对细胞模型损伤的影响。

1 材料与方法

1.1材料及试剂 人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y购自美国典型培养物保藏中心；胎牛血清、双抗、胰蛋白酶、DMEM培养基均购自美国Hyclone公司；视黄酸购自美国Sigma公司；LncRNA MEG3引物、β-actin引物、LncRNA MEG3 siRNA均及其对照siRNA购自上海吉玛制药技术有限公司；Trizol、Lipofectamine2000均购自美国Invitrogen公司，逆转录试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司；2×SYBR Green RT-PCR混合物购自南京诺唯赞生物有限公司；……