LncRNA TMPO-AS1调控miR-143-3p的表达影响肺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡
2021-09-01周斌锋彭兵锋王志强喻国平张小强
周斌锋 彭兵锋 王志强 喻国平 张小强
(1鹰潭市人民医院心胸外科,江西 鹰潭 335000;2南昌大学附属第二医院胸外科)
肺癌是临床常见恶性肿瘤之一,据调查研究显示全世界范围内肺癌发病率持续升高,其中非小细胞肺癌是肺癌的主要病理类型,目前临床常采用手术、化疗等手段治疗肺癌,但肺癌患者生存率仍未明显升高〔1〕。近年来,免疫治疗与分子靶向治疗成为研究热点,因而深入探究肺癌发生的分子生物过程有助于寻找新的治疗靶点以此提高患者生存率。长链非编码RNA(LncRNA)TMPO-AS1可促进非小细胞肺癌、前列腺癌等肿瘤发生及发展〔2,3〕。但TMPO-AS1在肺癌发生及发展过程中的分子机制尚未完全阐明。LncBase v.2网站预测显示微小RNA-143-3p(miR-143-3p)可能是TMPO-AS1的靶基因,研究表明miR-143-3p在结肠癌、宫颈癌、喉部鳞状细胞癌等恶性肿瘤中均呈低表达,上调其表达可抑制肿瘤细胞增殖及转移〔4~8〕。但TMPO-AS1是否可通过靶向miR-143-3p促进肺癌发生及发展尚未可知。因此,本研究主要探讨TMPO-AS1与miR-143-3p在肺癌细胞中的相互作用关系,初步分析其对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,为肺癌靶向治疗提供潜在靶点。
1 材料与方法
1.1材料与试剂 BEAS-2B、肺癌细胞A549、SPC-A-1、H446、PC-9均购自美国ATCC细胞库。DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶均购自美国Gibco公司;二甲基亚砜(DMSO)购自美国Sigma公司;Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司;Matrigel基质胶购自美国BD公司;TMPO-AS1小干扰RNA(si-TMPO-AS1)、si-con、miR-143-3p mimics、miR-con、miR-143-3p抑制剂(anti-miR-143-3p)、anti-miR-con均购自上海吉玛制药技术有限公司;pcDNA3.1购自北京合生基因科技有限公司;Transwell小室购自美国Corning公司;MTT细胞增殖试剂盒购自美国Sigma公司;Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒购自北京宝赛生物技术有限公司;……
