徐成阳 段红艳 李明艳

(河南省人民医院暨郑州大学人民医院国际医疗中心一病区，河南 郑州 450003)

血糖变化引起的血管内皮受损是动脉粥样硬化性病变的原因，而动脉粥样硬化是糖尿病(DM)血管并发症的病理基础，DM血管并发症可导致患者致死、致残〔1，2〕。研究DM血管并发症的发生机制，针对发病机制为靶点的治疗有助于DM慢性并发症的防治〔3〕。研究发现长链非编码RNA(lncRNA)与血管内皮细胞病理性增殖及脂代谢相关，在DM及其血管并发症中具有重要作用〔4〕。核旁丛组装转录本1(NEAT1)是一个非编码RNA，研究发现抑制NEAT1通过靶向miR-204和调节核转录因子(NF)-κB途径减轻了脂多糖(LPS)诱导的细胞损伤〔5〕。上调NEAT1有助于神经保护机制抵抗神经元损伤〔6〕。沉默NEAT1可减弱血管平滑肌细胞增殖和迁移〔7〕。微小RNA(miRNA)参与调控DM及相关疾病〔8〕。miR-217通过调控SIRT1参与高糖诱导的内皮细胞凋亡〔9〕。过表达miR-217还可促进人皮肤成纤维细胞的衰老〔10〕。然而lncRNA NEAT1对高糖诱导血管内皮细胞的影响及其机制是否与miR-217有关还尚未清楚。本实验旨在研究lncRNA NEAT1对高糖诱导血管内皮细胞的影响及其机制是否与miR-217有关。

1 材料与方法

1.1材料 人脐静脉内皮细胞株EAhy926(上海细胞库)；DMEM培养基(美国Hyclone)；Trizol试剂、荧光定量试剂盒(美国Progema)；RIPA蛋白裂解液(上海碧云天)；细胞计数试剂盒(CCK)-8、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)试剂盒、双荧光素酶报告基因检测试剂盒(北京Solarbio)；载体质粒(上海伯易生物)。

1.2方法

1.2.1细胞培养与分组 EAhy926细胞常规培养在DMEM培养液中，用终浓度为25 mmol/L葡萄糖的培养液培养细胞24 h作为高糖(HG)组，正常培养的细胞作为对照(NG)组；……