闫磊 周宏博 崔红 梁军 孙晓冬 朱梅 佟雷

(牡丹江医学院 1组胚教研室，黑龙江 牡丹江 157011；2红旗医院；3干细胞研究所；4药剂学教研室)

胶质细胞瘤是中枢神经系统内最常见的原发性恶性肿瘤，具有发病率高、对放疗和化疗抵抗并容易复发等特点〔1〕。新的治疗方式例如中药联合肿瘤抑制基因治疗越来越被关注。Rab23属于小GTP 酶，是Ras致癌基因家族的一名成员，位于染色体 6p12.1，最早是1994年从小鼠脑部分离得到，Rab23基因在肝癌、胃癌等肿瘤的发生、发展中起到重要作用〔2〕。人参皂甙Rg3是人参二醇类四环三萜皂甙，具有显著的抗肿瘤作用〔3〕。本实验选取胶质瘤U251细胞为实验对象，探讨Rab23基因联合人参皂甙Rg3对U251细胞增殖和凋亡的影响。

1 材料和方法

1.1材料 细胞 胶质瘤细胞系U251，购自美国ATCC公司。试剂Rab23质粒，购自中国质粒载体细胞基因保藏中心；人参皂甙Rg3(纯度99%)，购自天津马克生物有限公司；四甲基偶氮唑蓝(MTT)试剂购自美国Sigma公司；反转录试剂盒购自美国Invitrogen公司；仪器5417R台式高速离心机购自德国Ep-pendorf生命科学有限公司产品；JYH27020电泳仪购自美国 Bio-Rad公司产品；ELX800酶标仪购自美国Bio-Tek仪器有限公司产品。

1.2实验方法

1.2.1U251细胞培养与转染〔4〕将U251细胞培养至含10%胎牛血清、含100 U/L青链霉素的DMEM 培养基中，置于5%CO2、37℃恒温培养箱中，每隔1～2 d 用胰蛋白酶传代1次。将U251细胞以2.5×104个/ml的密度接种在铺有盖玻片的24孔板中。细胞80%融合后，按说明书操作转染细胞，质粒终浓度：25 mol/L。6 h后终止转染，用含10%小牛血清的 RPMI1640 培养液继续培养。

1.2.2分组与给药方法〔4〕将胶质瘤U251细胞分为4组，空白对照组，Rab23转染组，人参皂甙Rg3组和Rab23+人参皂甙Rg3组。……