周 青，张晏洁，薛 源，芮建中，周国华

东部战区总医院 临床药学科，南京210002

骨肉瘤是临床常见的原发性骨恶性肿瘤，好发于儿童与青少年，具有病情进展快、肺转移早、病死率高等特点。目前临床对骨肉瘤的治疗，多以外科治疗为主、化疗或其他治疗为辅[1]。近年来，国内外发布的最新的骨肉瘤诊疗相关指南均推荐甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）作为骨肉瘤的一线化疗药物，而大剂量甲氨蝶呤（HD-MTX）联合亚叶酸钙（CF）解救疗法已成为治疗骨肉瘤的重要手段，该方案可显著提高患者的生存率[2]。但由于给药剂量大，MTX 在体内的血药浓度往往较高，在提高疗效的同时也导致毒副反应发生率相应增加，且MTX 在体内代谢具有显著的个体差异，需密切监测患者血药浓度，在确保疗效的同时也减少不良反应的发生。此外，越来越多的研究表明，MTX 体内主要代谢产物7-羟基甲氨蝶呤（7-OH MTX）的血药浓度与MTX 不良反应具有相关性[3]。因此，同时监测MTX 及7-OH MTX 的血药浓度可更为精准、灵敏地预判HD-MTX 临床不良反应的发生，这对于临床合理用药具有重要意义[4]。

本研究建立了一种快速、准确、灵敏的LC-MS/MS 定量分析方法，能够同时测定人血清中MTX 和7-OH MTX 的药物浓度，并应用于临床治疗药物监测（TDM），同时为MTX 人体药动学研究及个体化用药实践提供方法学参考。

1 仪器与药品、试剂

1.1 仪器

Agilent 1260 高效液相色谱仪（美国Agilent 公司）；API 4000 三重四级杆质谱仪（美国AB 公司）；涡旋混合仪（美国Scientific Industries 公司）；高速冷冻离心机（美国Beckman 公司）；十万分之一电子天平（瑞士Mettler Toledo 公司）。

1.2 药品与试剂

甲氨蝶呤对照品（纯度99.8%，批号100138-201606，中国食品药品检定研究院）；……