禽白血病病毒p27基因在毕赤酵母中的表达
2021-08-31曹利利宫鹏涛郭衍冰宋建臣姚新华苑淑贤
曹利利,宫鹏涛,姜 旭,,郭衍冰,宋建臣,董 航,姚新华,苑淑贤,王 治
(1.吉林省畜牧兽医科学研究院,长春 130062;2.吉林大学动物医学学院,长春 130062;3.延边大学农学院,延边 133000;4.北部战区疾病预防控制中心,济南 250014)
禽白血病(avian leukosis)是指由反转录病毒科禽α反转录病毒属的禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的,以造血细胞增生为主的一类肿瘤性疾病[1]。ALV作为我国二类动物疫病,能够诱发禽类的多种肿瘤性疾病,致使生产性能下降,甚至死亡。自1908年首次分离该病毒以来,ALV呈全球流行,严重制约了世界各国的禽业发展[2]。ALV作为国家中长期动物疫病防治规划(2012~2020年)中优先防治的病原[3],目前只能依靠病原检测为手段淘汰阳性鸡,进而达到净化的目的[4]。因此,精准诊断对于有效防控ALV至关重要[5]。
ALV基因组中主要包括gag、pol、env基因,在不同亚群间,gag编码的p27蛋白十分保守且同源性达96%以上[6],含有许多可以用于检测的抗原表位[7]。以往研究常借助原核系统表达p27蛋白用于ALV检测方法的建立。研究表明,酵母方法和大肠杆菌表达相比,有细胞繁殖快,培养与试验方法简单,适用于工业生产等优势[8],且因毕赤酵母表达外源蛋白的高效性,研究者们已经实现多种外源蛋白的高效表达[9-10]。而目前国内外尚无毕赤酵母表达ALV p27蛋白的相关报道。利用毕赤酵母表达外源蛋白的高稳定、高表达、高分泌、高密度生长的特性,本研究对禽白血病的种间特异性抗原p27蛋白进行表达,获得的表达产物为制备包被抗原,建立禽白血病病毒ELISA检测方法或组装试剂盒奠定基础。……
