仝慧娴，姚晓慧，王舒丰，魏建超，刘 珂，邵东华，邱亚峰，马志永，李蓓蓓，刘聚祥

（1.河北农业大学动物医学院，保定 071000；2.中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

多黏菌素作为饲料添加剂和治疗药物在动物养殖业中应用多年。近年来随着耐药性问题越来越严重，该药物被重新应用于人医临床，治疗多重耐药革兰氏阴性菌感染，特别是碳青霉烯耐药肠杆菌感染。长期以来，多黏菌素耐药率比较低，其耐药机制主要是特定基因突变激活PmrA/PmrB和PhoP/PhoQ双调控系统，对细胞膜LPS中的脂质A修饰后导致耐药[1]。2016年，多黏菌素耐药基因mcr-1首次在中国被发现[2]，由于其主要由质粒携带，可以在不同细菌间横向传播，使多黏菌素耐药率持续快速升高，引起了全世界的关注与重视，丹麦、法国、新西兰等近50个国家相继检测到了该基因[3]。此外，人源临床分离菌中也检测到了mcr-1，但其检出率远远低于养殖动物源细菌[4-6]，Yi等[7]提出，人源临床分离菌中检测到的mcr-1很可能也来源于动物中的mcr-1基因。

探明耐药菌的亲缘关系对耐药传播机制研究和耐药性防控十分重要。常用的分子分型方法有脉冲场凝胶电泳（pulsed field gel electrophoresis，PFGE）、多位点序列分型（multilocus sequence typing，MLST）、随机扩增多态性分析（random amplified polymorphic DNA，RAPD）、多位点可变数目串联重复序列（multiple locus variable-number tandem repeat analysis，MLVA）和核糖体分型等[8-9]。本研究对我国9个省份33个猪养殖场中mcr-1的流行情况进行调查，采用PFGE和RAPD两种方法分析mcr-1阳性菌株的亲缘关系，并对两种方法的分型能力和操作可行性进行比较，为猪源mcr-1耐药菌株的防控及分子分型方法的选择提供科学依据。……