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副猪嗜血杆菌荧光定量PCR的建立和临床应用

2021-08-31庞琳琳赵秋华张俊杰李蓓蓓邵东华邱亚峰马志永袁万哲魏建超

中国动物传染病学报 2021年4期
关键词:检测方法

庞琳琳 ,赵秋华 ,王 欣 ,张俊杰 ,郭 爽 ,李蓓蓓 ,刘 珂 ,邵东华 ,邱亚峰 ,马志永 ,袁万哲,魏建超

(1.河北农业大学动物医学院,保定 071001;2.中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;3.上海市闵行区动物疫病预防控制中心,上海 201109)

副猪嗜血杆菌(Heamophilus parasuis,Hps)是一种多形态依赖NAD的革兰氏阴性球菌,属于巴斯德科(Pastteurellacea)嗜血杆菌属(Heamophillus)[1]。Hps是上呼吸道的常在菌,也是一种条件致病菌,可引起全身性的疾病,即以纤维性多浆膜炎、关节炎和脑膜炎或急性肺炎和急性败血症为特征的Gläserser病[2-3]。迄今为止,已经分离出15种不同血清型Hps。有文献报道,血清型1、5、10、12、13和14型为强毒株,腹腔感染Hps仔猪4 d内能引起死亡;血清型2、4、15型为中等毒力菌株,接种SPF猪可以引起多发性浆膜炎,但不会出现死亡;而其他的血清型归为无毒力性菌株,感染Hps仔猪时并未出现相关的临床症状[4-6]。目前Hps呈全球性分布;血清型4型在巴西最普遍,其次是血清型5、14、13和2型[7];而在中国血清型4型和5型最为流行,其次为5、12和13型[8-10],给我国养猪业带来了巨大的经济损伤。

近年来,Hps在国内广泛流行,死亡率可高达50%。因此,Hps的早期诊断诊断方法的应用尤为重要。细菌性疾病传统的检测方法是细菌的分离培养,但此法具有耗时较长,工作量较大等缺点。目前,用于检测Hps主要方法有血清学和分子学两种[11];其中血清学方法最基本的原理为抗原抗体结合,但在Hps的感染早期机体内的抗体水平较低,应用此法不易检测[12-13];在临床上一般使用常规PCR和荧光定量PCR的分子学检测方法,但常规PCR不仅不能对病料中的细菌进行定量检测还极易出现假阳性[14-15];……

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