苑凤婷，孙 斌

（黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江大庆 163319）

细胞核DNA 是相对稳定的遗传活性物质，在生物体细胞核中具有恒定性和保守性的特点[1]。在动物死后一段时间，细胞核DNA 会发生降解、减少，直至消失[2]。本实验以断颈处死的31日龄雏麻鸡为实验动物模型，采取脑组织，提取DNA 做琼脂糖凝胶电泳。根据电泳图谱，观察禽死后脑组织DNA变化的规律与特征。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物

健康雏麻鸡6 只，31日龄，雌雄不限，实验动物均为大庆市让胡路区某养殖场提供。

1.1.2 主要试剂

PBS 液、液氮、裂解液、缓冲液GA、缓冲液GB、缓冲液GD、RNaseA 溶液、蛋白酶K、无水乙醇、漂洗液PW、洗脱缓冲液TE、吸附柱CB3、收集管、5×TBE 电泳缓冲液、6×电泳载样缓冲液、溴化乙锭(EB)溶液母液、琼脂糖、橡皮膏。

1.1.3 主要器材

平皿、常规解剖器械、眼科剪、恒温箱、滤纸、研钵、EP 管、离心机、锥形瓶、微波炉、样品梳子、移液器、水平电泳槽、水浴锅、凝胶成像系统。

1.2 方法

1.2.1 取材

将13 只雏麻鸡适应性饲养12 天，同时断颈处死，置室温为14.5℃有暖气的解剖室。

取材部位：全脑组织

取材方法：于雏麻鸡处死后立即进行开颅取脑一次作为对照组（0 min），之后的12 个对照组（1 min、5 min、10 min、30 min、1 h、3 h、5 h、12 h、24 h、3 d、5 d、10 d）采取相同方法采取脑组织，每组1 只雏麻鸡。

取材处理：取材依次编号放入无菌培养皿中置于-4℃的恒温箱中，等待进行DNA 含量测定。

取材分组：同时间采集的一个样品记录为一组，共计组别为13 组。

1.2.2 脑组织研磨

称取雏麻鸡脑组织取材2.5 g，用冰PBS 液清洗去除血迹，滤纸吸干，放入已经预先置于保温箱内的研钵中，保温箱能尽量减少液氮的挥发使温度恒定。……