王天雪，孙 强，李 佳

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是占90%以上比例的口腔癌的病理亚型，是第六位常见的恶性肿瘤。近些年，尽管在OSCC治疗(包括手术、化疗和放射治疗)和分子机制研究方面均取得了重要进展，但OSCC具体的发病和进展机制至今仍不完全明晰，OSCC的复发和转移率很高，患者5 年生存率相对较差。对影响OSCC进展的关键分子靶点的鉴定和筛选将为制定OSCC诊断和治疗的新策略提供参考依据。

环状RNAs(circular RNAs，circRNAs)是通过将3’端连接到RNA的5’端而形成圆环结构的一类独特的内源性非编码RNA，不仅具有高度稳定的生物学特点，还在调节肿瘤细胞增殖、凋亡和自噬等多种病理生理过程中发挥着重要作用。环状RNA PIP5K1A(circRNA PIP5K1A，circPIP5K1A)已被发现在胃癌、非小细胞肺癌、结肠癌和卵巢癌中上调表达并发挥促癌作用，而其在OSCC中的表达和作用并不清楚，该研究观察circPIP5K1A在OSCC组织和细胞系中的表达与作用，并分析其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 材料

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主要试剂与仪器 胎牛血清、DMEM培养基、Lipofectamine 3000和TRIzol试剂(美国Invitrogen公司)；RNase R试剂(美国Epicentre公司)；CCK-8试剂盒、Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒、cDNA第一链合成(M-MLV)试剂盒和RT-qPCR检测试剂盒(南京凯基生物公司)；抗β-catenin和Wnt1抗体(美国Santa Cruz公司)；抗GAPDH抗体和HRP标记的二抗(上海碧云天生物公司)。LightCycler 480实时荧光定时PCR系统(瑞士Roche公司)；318C+ 酶标仪(上海沛欧分析仪器有限公司)；BX53MRF-S显微镜(日本Olympus 公司)；FACSCanto II流式细胞仪(美国BD公司)；蛋白垂直电泳电转系统(美国Bio-Rad公司)。

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临床样本获取 样本来源于郑州大学第一附属医院口腔颌面外科行肿瘤切除术的20例T1-T3期OSCC患者，并收集癌组织和癌旁组织样本。……